Pereiti prie turinio
BT-20 ląstelės
Audinys
Krūtys, pieno liauka
Liga
Invazinė duktalinė karcinoma
Sinonimai
BT 20, BT20

Dokumentai

BT-20 ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300130

BT-20 ląstelių linija – tai žmogaus krūties adenokarcinomos ląstelių linija, kuri buvo išauginta 1958 m. iš 74 metų amžiaus kaukazietės moters piktybinio audinio...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

BT-20 ląstelių linija yra žmogaus krūties adenokarcinomos ląstelių linija, sukurta 1958 m. iš 74 metų kaukazietės pacientės piktybinio audinio. Ši ląstelių linija pasižymi epitelio morfologija ir dažnai naudojama krūties vėžio biologijos tyrimuose, ypač tiriant hormoninį vėžio augimo reguliavimą, genų raišką ir terapinių preparatų veiksmingumą prieš krūties vėžį.

BT-20 ląstelės pasižymi gebėjimu formuoti navikus, kai yra implantuojamos į imunodeficitines peles, todėl yra naudingas krūties vėžio in vivo modelis. Šios ląstelės išreiškia estrogeno, progesterono ir androgeno receptorius, todėl jos yra tinkamos hormonų atsako keliams tirti. Be to, atlikus BT-20 ląstelių genetinę analizę, buvo aptiktos tokių genų kaip TP53 ir PIK3CA mutacijos, kurios dažnai pasitaiko sergant krūties vėžiu, o tai patvirtina jų naudojimą genetiniams ir farmakologiniams tyrimams.

In vitro BT-20 ląstelės naudojamos vėžinių ląstelių proliferacijos, migracijos ir invazijos mechanizmams tirti. Jos taip pat naudojamos chemoterapijos preparatų citotoksiškumui įvertinti, todėl yra labai svarbios ikiklinikiniams vaistų nuo vėžio bandymams. BT-20 ląstelės yra lengvai pritaikomos įvairioms auginimo sąlygoms ir tvirtai auga in vitro, todėl jos yra vertingas šaltinis vėžio tyrimų laboratorijose, kuriose daugiausia dėmesio skiriama krūties vėžio pagrindiniams mechanizmams tirti ir naujoms gydymo strategijoms kurti.

Audinys
Krūtys, pieno liauka
Liga
Invazinė duktalinė karcinoma
Sinonimai
  • BT 20
  • BT20

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Tumorogeninis
Taip, nuogoms pelėms. Formuoja II laipsnio adenokarcinomas
Kariotipas
Modalinis skaičius = 50, daug žymeklių, kuriems būdingiausi dideli subtelocentrikai. (P87) Hiperdiploidinis su anomalijomis, įskaitant fragmentuotas chromosomas, lūžius, antrinius susiaurėjimus, translokacijas, submetacentrines ir telocentrines žymes

04Identifikatoriai

Nuoroda
BT-20 (Cytion katalogo numeris 300130)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0178

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
HLA A1, Bw16 (+/-)
Izofermentai
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Fenotipo dažnio produktas: 0.0115
Onkogenai
Wnt4 +, wnt7h +
Mutacijų profilis
TP53 mutavimas
Atvirkštinė transkriptazė
Neigiamas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2 per maždaug 6 dienas sudarys konfluentinį sluoksnį.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
74 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių