Ga naar de inhoud
BT-20 cellen
Weefsel
Borst, borstklier
Ziekte
Invasief ductaal carcinoom
Synoniemen
BT 20, BT20

Documenten

BT-20 cellen

Cell line · Productnummer 300130

De BT-20-cellijn is een menselijke adenocarcinoomcellijn van de borst die in 1958 is geïsoleerd uit het kwaadaardige weefsel van een 74-jarige blanke vrouw...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De BT-20 cellijn is een menselijke borstadenocarcinoom cellijn die in 1958 werd gecreëerd uit het kwaadaardige weefsel van een 74-jarige Kaukasische vrouwelijke patiënt. Deze cellijn vertoont een epitheliale morfologie en wordt vaak gebruikt in onderzoek naar borstkankerbiologie, met name in studies naar de hormonale regulatie van kankergroei, genexpressie en de werkzaamheid van therapeutische middelen tegen borstkanker.

BT-20 cellen worden gekenmerkt door hun vermogen om tumoren te vormen wanneer ze geïmplanteerd worden in immuungecompromitteerde muizen, waardoor ze dienen als een nuttig in vivo model voor borstkanker. Deze cellen brengen receptoren voor oestrogeen, progesteron en androgeen tot expressie, waardoor ze relevant zijn voor studies naar hormoonresponsroutes. Daarnaast heeft genetische analyse van BT-20 cellen mutaties aangetoond in genen zoals TP53 en PIK3CA, die vaak voorkomen bij borstkanker, waardoor hun gebruik in genetisch en farmacologisch onderzoek wordt ondersteund.

In vitro worden BT-20 cellen gebruikt om de mechanismen van proliferatie, migratie en invasie van kankercellen te bestuderen. Ze worden ook gebruikt om de cytotoxiciteit van chemotherapiemiddelen te beoordelen, waardoor ze van cruciaal belang zijn voor het preklinisch testen van geneesmiddelen tegen kanker. Het aanpassingsvermogen van BT-20 cellen aan verschillende kweekomstandigheden en hun robuuste groei in vitro maken ze tot een waardevolle bron voor kankeronderzoekslaboratoria die zich richten op de onderliggende mechanismen van borstkanker en de ontwikkeling van nieuwe therapeutische strategieën.

Weefsel
Borst, borstklier
Ziekte
Invasief ductaal carcinoom
Synoniemen
  • BT 20
  • BT20

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen. Vormt graad II adenocarcinomen
Karyotype
Modaal aantal = 50, veel markers met grote subtelocentrische het meest karakteristiek. (P87) Hyperdiploïd met afwijkingen waaronder gefragmenteerde chromosomen, breuken, secundaire vernauwingen, translocaties, submetacentrische en telocentrische markers

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
BT-20 (Cytion catalogusnummer 300130)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0178

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
HLA A1, Bw16 (+/-)
Iso-enzymen
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Fenotype Frequentie Product: 0.0115
Oncogenen
Wnt4 +, wnt7h +
Mutatieprofiel
TP53 mutatie
Reverse transcriptase
Negatief

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2 zal in ongeveer 6 dagen een confluente laag opleveren.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
74 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch