الانتقال إلى المحتوى
خلايا BT-20
الأنسجة
الثدي، الغدة الثديية
المرض
سرطان الأقنية القنوي الغازي
المرادفات
BT 20, BT20

المستندات

خلايا BT-20

Cell line · رقم المنتج 300130

سلسلة الخلايا BT-20 هي سلسلة خلايا سرطانية غدية في الثدي البشري، تم إنشاؤها في عام 1958 من نسيج خبيث مأخوذ من امرأة قوقازية تبلغ من العمر 74 عامًا...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خط خلايا BT-20 هو خط خلايا سرطان الثدي الغدي البشري الذي تم إنشاؤه في عام 1958 من نسيج خبيث لمريضة قوقازية تبلغ من العمر 74 عاماً. يُظهر هذا الخط الخلوي مورفولوجيا شبيهة بالظهارة وغالباً ما يُستخدم في الأبحاث التي تركز على بيولوجيا سرطان الثدي، وخاصة في الدراسات التي تستكشف التنظيم الهرموني لنمو السرطان والتعبير الجيني وفعالية العوامل العلاجية ضد سرطان الثدي.

تتميز خلايا BT-20 بقدرتها على تكوين أورام عند زراعتها في فئران ناقصة المناعة، وبالتالي فهي بمثابة نموذج مفيد في الجسم الحي لسرطان الثدي. وتعبر هذه الخلايا عن مستقبلات هرمون الإستروجين والبروجسترون والأندروجين، مما يجعلها ذات صلة بالدراسات حول مسارات الاستجابة الهرمونية. بالإضافة إلى ذلك، كشف التحليل الوراثي لخلايا BT-20 عن طفرات في جينات مثل TP53 وPIK3CA، وهي طفرات شائعة في سرطان الثدي، مما يدعم استخدامها في الأبحاث الوراثية والدوائية.

في المختبر، تُستخدم خلايا BT-20 لدراسة آليات تكاثر الخلايا السرطانية والهجرة والغزو. كما أنها تُستخدم أيضاً لتقييم السمية الخلوية لعوامل العلاج الكيميائي، مما يجعلها ضرورية للاختبارات قبل السريرية للأدوية المضادة للسرطان. إن قدرة خلايا BT-20 على التكيف مع ظروف الاستنبات المختلفة ونموها القوي في المختبر يجعلها مورداً قيماً لمختبرات أبحاث السرطان التي تركز على الآليات الكامنة وراء سرطان الثدي وتطوير استراتيجيات علاجية جديدة.

الأنسجة
الثدي، الغدة الثديية
المرض
سرطان الأقنية القنوي الغازي
المرادفات
  • BT 20
  • BT20

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية تشكل سرطانات غدية من الدرجة الثانية
النمط الكروموسومي
العدد النموذجي = 50، العديد من العلامات مع وجود علامات فرعية كبيرة ذات مراكز فرعية كبيرة أكثر ما يميزها. (P87) فرط ازدواج الصبغيات مع وجود تشوهات بما في ذلك الكروموسومات المجزأة، والفواصل، والتقلصات الثانوية، والانتقالات، والعلامات تحت المتماثلة والعلامات التيلوسنترية

04المعرّفات

المرجع
BT-20 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 300130)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0178

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
HLA A1، Bw16 (+/-)
الإيزوزيمات
PGM3, 1, PGM1, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, منتج تردد النمط الظاهري 0.0115
الجينات المسرطنة
Wnt4 +، wnt4 +، wnt7h +
الأنماط الطفريّة
طفرة TP53
إنزيم النسخ العكسي
سلبي

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2 ستنتج طبقة متقاربة في حوالي 6 أيام
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
74 سنة
الأصل العرقي
قوقازي