Μετάβαση στο περιεχόμενο
Κύτταρα BT-20
Ιστός
Μαστός, μαστικός αδένας
Ασθένεια
Διηθητικό καρκίνωμα του πόρου
Συνώνυμα
BT 20, BT20

Έγγραφα

Κύτταρα BT-20

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300130

Η κυτταρική σειρά BT-20 είναι μια κυτταρική σειρά ανθρώπινου αδενοκαρκινώματος του μαστού, η οποία δημιουργήθηκε το 1958 από κακοήθη ιστό μιας 74χρονης γυναίκας καυκάσιας καταγωγής...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά BT-20 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά αδενοκαρκινώματος του μαστού που δημιουργήθηκε το 1958 από τον κακοήθη ιστό μιας 74χρονης καυκάσιας ασθενούς. Αυτή η κυτταρική σειρά παρουσιάζει μορφολογία που μοιάζει με επιθήλιο και χρησιμοποιείται συχνά σε έρευνες που επικεντρώνονται στη βιολογία του καρκίνου του μαστού, ιδίως σε μελέτες που διερευνούν την ορμονική ρύθμιση της ανάπτυξης του καρκίνου, την έκφραση των γονιδίων και την αποτελεσματικότητα των θεραπευτικών παραγόντων κατά του καρκίνου του μαστού.

Τα κύτταρα BT-20 χαρακτηρίζονται από την ικανότητά τους να σχηματίζουν όγκους όταν εμφυτεύονται σε ανοσοκατεσταλμένα ποντίκια, αποτελώντας έτσι ένα χρήσιμο in vivo μοντέλο για τον καρκίνο του μαστού. Τα κύτταρα αυτά εκφράζουν υποδοχείς οιστρογόνων, προγεστερόνης και ανδρογόνων, γεγονός που τα καθιστά σημαντικά για μελέτες σχετικά με τα μονοπάτια ορμονικής απόκρισης. Επιπλέον, η γενετική ανάλυση των κυττάρων BT-20 αποκάλυψε μεταλλάξεις σε γονίδια όπως το TP53 και το PIK3CA, τα οποία είναι κοινά στον καρκίνο του μαστού, υποστηρίζοντας τη χρήση τους στη γενετική και φαρμακολογική έρευνα.

In vitro, τα κύτταρα BT-20 χρησιμοποιούνται για τη μελέτη των μηχανισμών πολλαπλασιασμού, μετανάστευσης και εισβολής των καρκινικών κυττάρων. Χρησιμοποιούνται επίσης για την αξιολόγηση της κυτταροτοξικότητας των χημειοθεραπευτικών παραγόντων, γεγονός που τα καθιστά κρίσιμα για τις προκλινικές δοκιμές αντικαρκινικών φαρμάκων. Η προσαρμοστικότητα των κυττάρων BT-20 σε διάφορες συνθήκες καλλιέργειας και η ισχυρή ανάπτυξή τους in vitro τα καθιστούν πολύτιμο πόρο για τα ερευνητικά εργαστήρια για τον καρκίνο που εστιάζουν στους υποκείμενους μηχανισμούς του καρκίνου του μαστού και στην ανάπτυξη νέων θεραπευτικών στρατηγικών.

Ιστός
Μαστός, μαστικός αδένας
Ασθένεια
Διηθητικό καρκίνωμα του πόρου
Συνώνυμα
  • BT 20
  • BT20

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Ογκογόνος
Ναι, σε γυμνά ποντίκια. Σχηματίζει αδενοκαρκινώματα βαθμού ΙΙ
Καρυότυπος
Τυπικός αριθμός = 50, πολλοί δείκτες με μεγάλα υποτελοκεντρικά χαρακτηριστικά. (P87) Υπερδιπλοειδές με ανωμαλίες που περιλαμβάνουν κατακερματισμένα χρωμοσώματα, σπασίματα, δευτερογενείς στενώσεις, μετατοπίσεις, υπομετακεντρικούς και τελοκεντρικούς δείκτες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
BT-20 (αριθμός καταλόγου Cytion 300130)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_0178

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση αντιγόνου
HLA A1, Bw16 (+/-)
Ισοένζυμα
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Προϊόν συχνότητας φαινοτύπων: 0.0115
Ογκογονίδια
Wnt4 +, wnt7h +
Προφίλ μεταλλάξεων
TP53 mut
Αντίστροφη μεταγραφάση
Αρνητικό

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 x 104 κύτταρα/cm2 θα αποδώσουν ένα συγχωνευμένο στρώμα σε περίπου 6 ημέρες.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
74 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος