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Células BT-20
Pañuelo de papel
Pecho, glándula mamaria
Enfermedad
Carcinoma ductal invasivo
Sinónimos
BT 20, BT20

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Células BT-20

Cell line · Número de producto 300130

La línea celular BT-20 es una línea celular de adenocarcinoma de mama humano que se estableció en 1958 a partir del tejido maligno de una mujer caucásica de 74 años...

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01Información general

Descripción

La línea celular BT-20 es una línea celular de adenocarcinoma de mama humano creada en 1958 a partir del tejido maligno de una paciente caucásica de 74 años. Esta línea celular presenta una morfología similar a la epitelial y se utiliza a menudo en investigaciones centradas en la biología del cáncer de mama, especialmente en estudios que exploran la regulación hormonal del crecimiento del cáncer, la expresión génica y la eficacia de los agentes terapéuticos contra el cáncer de mama.

Las células BT-20 se caracterizan por su capacidad para formar tumores cuando se implantan en ratones inmunodeprimidos, por lo que constituyen un modelo in vivo útil para el cáncer de mama. Estas células expresan receptores de estrógenos, progesterona y andrógenos, lo que las hace pertinentes para estudios sobre las vías de respuesta hormonal. Además, el análisis genético de las células BT-20 ha revelado mutaciones en genes como TP53 y PIK3CA, comunes en el cáncer de mama, lo que respalda su uso en la investigación genética y farmacológica.

In vitro, las células BT-20 se utilizan para estudiar los mecanismos de proliferación, migración e invasión de las células cancerosas. También se emplean para evaluar la citotoxicidad de los agentes quimioterapéuticos, por lo que son fundamentales para los ensayos preclínicos de fármacos contra el cáncer. La adaptabilidad de las células BT-20 a diversas condiciones de cultivo y su robusto crecimiento in vitro las convierten en un valioso recurso para los laboratorios de investigación oncológica centrados en los mecanismos subyacentes del cáncer de mama y el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas.

Pañuelo de papel
Pecho, glándula mamaria
Enfermedad
Carcinoma ductal invasivo
Sinónimos
  • BT 20
  • BT20

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sí, en ratones desnudos. Forma adenocarcinomas de grado II
Cariotipo
Número modal = 50, muchos marcadores con grandes subtelocéntricos lo más característico. (P87) Hiperdiploide con anomalías que incluyen cromosomas fragmentados, roturas, constricciones secundarias, translocaciones, marcadores submetacéntricos y telocéntricos

04Identificadores

Referencia
BT-20 (número de catálogo 300130 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0178

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de antígenos
HLA A1, Bw16 (+/-)
Isoenzimas
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Fenotipo Frecuencia Producto: 0.0115
Oncogenes
Wnt4 +, wnt7h +
Perfil mutacional
TP53 mut
Transcriptasa inversa
Negativo

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2 producirá una capa confluente en aproximadamente 6 días.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
74 años
Origen étnico
Caucásico