Mine otse sisu juurde
BT-20 rakud
Kude
Rind, rinnanäärme
Haigus
Invasiivne ductus kartsinoom
Sünonüümid
BT 20, BT20

Dokumendid

BT-20 rakud

Cell line · Toote number 300130

BT-20 rakuliin on inimese rinnanäärme adenokartsinoomi rakuliin, mis loodi 1958. aastal 74-aastase valgenahalise naispatsiendi pahaloomulisest koest...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

BT-20 rakuliin on inimese rinna adenokartsinoomi rakuliin, mis loodi 1958. aastal 74-aastase kaukaasia naissoost patsiendi pahaloomulise koe põhjal. Sellel rakuliinil on epiteelilaadne morfoloogia ja seda kasutatakse sageli rinnavähi bioloogiat käsitlevates uuringutes, eelkõige uuringutes, milles uuritakse vähi kasvu hormonaalset regulatsiooni, geeniekspressiooni ja rinnanäärmevähi vastaste ravimite tõhusust.

BT-20 rakke iseloomustab nende võime moodustada immuunpuudulikku hiirtesse implanteerituna kasvajaid, mis on seega kasulik in vivo mudel rinnavähi jaoks. Need rakud ekspresseerivad östrogeeni, progesterooni ja androgeeni retseptoreid, mistõttu on nad olulised hormoonide reageerimisradade uurimisel. Lisaks on BT-20 rakkude geneetiline analüüs näidanud mutatsioone sellistes geenides nagu TP53 ja PIK3CA, mis on levinud rinnavähi puhul, mis toetab nende kasutamist geneetilistes ja farmakoloogilistes uuringutes.

In vitro kasutatakse BT-20 rakke vähirakkude proliferatsiooni, migratsiooni ja invasiivsuse mehhanismide uurimiseks. Neid kasutatakse ka kemoteraapiaainete tsütotoksilisuse hindamiseks, mistõttu on nad kriitilise tähtsusega vähivastaste ravimite prekliinilises testimises. BT-20 rakkude kohanemisvõime erinevate kultuuritingimustega ja nende tugev kasv in vitro teevad neist väärtusliku ressursi vähiuuringute laboratooriumidele, mis keskenduvad rinnavähi tekkemehhanismidele ja uute ravistrateegiate väljatöötamisele.

Kude
Rind, rinnanäärme
Haigus
Invasiivne ductus kartsinoom
Sünonüümid
  • BT 20
  • BT20

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel. Moodustab II astme adenokartsinoomi
Karyotüüp
Modaalarv = 50, kõige iseloomulikumad on paljud suurte subtelotsentriliste markeritega märgid. (P87) Hüperdiploidne, millel on kõrvalekaldeid, sealhulgas fragmenteeritud kromosoomid, katkestused, sekundaarsed kitsendused, translokatsioonid, submetatsentrilised ja telotsentrilised markerid

04Tunnused

Viide
BT-20 (Cytioni katalooginumber 300130)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0178

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
HLA A1, Bw16 (+/-)
Isoensüümid
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, fenotüübi sageduse toode: 0.0115
Onkogeenid
Wnt4 +, wnt7h +
Mutatsiooniprofiil
TP53 mut
Pöördtranskriptaas
Negatiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 moodustab umbes 6 päeva jooksul konfluentse kihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
74 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia