BT-20 rakud
Cell line · Toote number 300130
BT-20 rakuliin on inimese rinnanäärme adenokartsinoomi rakuliin, mis loodi 1958. aastal 74-aastase valgenahalise naispatsiendi pahaloomulisest koest...
Kohandamine / Soovitused
- BT-20 rakudCell line€430.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
BT-20 rakuliin on inimese rinna adenokartsinoomi rakuliin, mis loodi 1958. aastal 74-aastase kaukaasia naissoost patsiendi pahaloomulise koe põhjal. Sellel rakuliinil on epiteelilaadne morfoloogia ja seda kasutatakse sageli rinnavähi bioloogiat käsitlevates uuringutes, eelkõige uuringutes, milles uuritakse vähi kasvu hormonaalset regulatsiooni, geeniekspressiooni ja rinnanäärmevähi vastaste ravimite tõhusust.
BT-20 rakke iseloomustab nende võime moodustada immuunpuudulikku hiirtesse implanteerituna kasvajaid, mis on seega kasulik in vivo mudel rinnavähi jaoks. Need rakud ekspresseerivad östrogeeni, progesterooni ja androgeeni retseptoreid, mistõttu on nad olulised hormoonide reageerimisradade uurimisel. Lisaks on BT-20 rakkude geneetiline analüüs näidanud mutatsioone sellistes geenides nagu TP53 ja PIK3CA, mis on levinud rinnavähi puhul, mis toetab nende kasutamist geneetilistes ja farmakoloogilistes uuringutes.
In vitro kasutatakse BT-20 rakke vähirakkude proliferatsiooni, migratsiooni ja invasiivsuse mehhanismide uurimiseks. Neid kasutatakse ka kemoteraapiaainete tsütotoksilisuse hindamiseks, mistõttu on nad kriitilise tähtsusega vähivastaste ravimite prekliinilises testimises. BT-20 rakkude kohanemisvõime erinevate kultuuritingimustega ja nende tugev kasv in vitro teevad neist väärtusliku ressursi vähiuuringute laboratooriumidele, mis keskenduvad rinnavähi tekkemehhanismidele ja uute ravistrateegiate väljatöötamisele.
- Kude
- Rind, rinnanäärme
- Haigus
- Invasiivne ductus kartsinoom
- Sünonüümid
- BT 20
- BT20
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteelilaadsed
- Tuumorigeenne
- Jah, alasti hiirtel. Moodustab II astme adenokartsinoomi
- Karyotüüp
- Modaalarv = 50, kõige iseloomulikumad on paljud suurte subtelotsentriliste markeritega märgid. (P87) Hüperdiploidne, millel on kõrvalekaldeid, sealhulgas fragmenteeritud kromosoomid, katkestused, sekundaarsed kitsendused, translokatsioonid, submetatsentrilised ja telotsentrilised markerid
04Tunnused
- Viide
- BT-20 (Cytioni katalooginumber 300130)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0178
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Antigeeni ekspressioon
- HLA A1, Bw16 (+/-)
- Isoensüümid
- PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, fenotüübi sageduse toode: 0.0115
- Onkogeenid
- Wnt4 +, wnt7h +
- Mutatsiooniprofiil
- TP53 mut
- Pöördtranskriptaas
- Negatiivne
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Külvitihedus
- 1 x 104 rakku/cm2 moodustab umbes 6 päeva jooksul konfluentse kihi.
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Doonori vanus
- 74 aastat
- Etniline kuuluvus
- Kaukaasia
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah
