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BT-20-Zellen
Gewebe
Brust, Brustdrüse
Krankheit
Invasives duktales Karzinom
Synonyme
BT 20, BT20

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BT-20-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300130

Die Zelllinie BT-20 ist eine menschliche Brustadenokarzinom-Zelllinie, die 1958 aus dem bösartigen Gewebe einer 74-jährigen kaukasischen Patientin etabliert wurde...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die BT-20-Zelllinie ist eine humane Adenokarzinom-Zelllinie der Brust, die 1958 aus dem bösartigen Gewebe einer 74-jährigen kaukasischen Patientin hergestellt wurde. Diese Zelllinie weist eine epithelähnliche Morphologie auf und wird häufig in der Forschung zur Biologie des Brustkrebses eingesetzt, insbesondere in Studien zur Erforschung der hormonellen Regulierung des Krebswachstums, der Genexpression und der Wirksamkeit von Therapeutika gegen Brustkrebs.

BT-20-Zellen zeichnen sich durch ihre Fähigkeit aus, Tumore zu bilden, wenn sie in immungeschwächte Mäuse implantiert werden, und dienen somit als nützliches In-vivo-Modell für Brustkrebs. Diese Zellen exprimieren Rezeptoren für Östrogen, Progesteron und Androgen, was sie für Studien über Hormonreaktionswege relevant macht. Außerdem wurden bei der genetischen Analyse von BT-20-Zellen Mutationen in Genen wie TP53 und PIK3CA festgestellt, die bei Brustkrebs häufig vorkommen, was ihre Verwendung in der genetischen und pharmakologischen Forschung unterstützt.

In vitro werden BT-20-Zellen verwendet, um die Mechanismen der Proliferation, Migration und Invasion von Krebszellen zu untersuchen. Sie werden auch eingesetzt, um die Zytotoxizität von Chemotherapeutika zu beurteilen, was sie für die präklinische Prüfung von Krebsmedikamenten unentbehrlich macht. Die Anpassungsfähigkeit von BT-20-Zellen an verschiedene Kulturbedingungen und ihr robustes Wachstum in vitro machen sie zu einer wertvollen Ressource für Krebsforschungslabors, die sich mit den zugrunde liegenden Mechanismen von Brustkrebs und der Entwicklung neuer therapeutischer Strategien befassen.

Gewebe
Brust, Brustdrüse
Krankheit
Invasives duktales Karzinom
Synonyme
  • BT 20
  • BT20

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen. Bildet Adenokarzinome des Grades II
Karyotyp
Modalzahl = 50, viele Marker mit großen Subtelozentrikern am charakteristischsten. (P87) Hyperdiploid mit Anomalien wie fragmentierten Chromosomen, Brüchen, sekundären Einschnürungen, Translokationen, submetazentrischen und telozentrischen Markern

04Bezeichner

Quellenangabe
BT-20 (Cytion Katalognummer 300130)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0178

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
HLA A1, Bw16 (+/-)
Isoenzyme
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Phänotyp-Häufigkeitsprodukt: 0.0115
Onkogene
Wnt4 +, wnt7h +
Mutationsprofil
TP53 mut
Reverse Transkriptase
Negativ

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm² ergeben in etwa 6 Tagen eine konfluente Schicht.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
74 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch