Buňky BT-20
Cell line · Číslo výrobku 300130
Buněčná linie BT-20 je buněčná linie lidského adenokarcinomu prsu, která byla izolována v roce 1958 z maligní tkáně 74leté ženy kavkazského původu...
Přizpůsobení / Doporučení
- Buňky BT-20Cell line€430.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
Buněčná linie BT-20 je buněčná linie lidského adenokarcinomu prsu, která byla vytvořena v roce 1958 z maligní tkáně 74leté pacientky kavkazského původu. Tato buněčná linie vykazuje morfologii podobnou epitelu a často se používá ve výzkumu zaměřeném na biologii rakoviny prsu, zejména ve studiích zkoumajících hormonální regulaci růstu rakoviny, genovou expresi a účinnost terapeutických látek proti rakovině prsu.
Buňky BT-20 se vyznačují schopností vytvářet nádory po implantaci do imunokompromitovaných myší, a slouží tak jako užitečný model in vivo pro rakovinu prsu. Tyto buňky exprimují receptory pro estrogen, progesteron a androgen, což je činí vhodnými pro studium cest hormonální odpovědi. Genetická analýza buněk BT-20 navíc odhalila mutace v genech, jako jsou TP53 a PIK3CA, které jsou běžné u rakoviny prsu, což podporuje jejich využití v genetickém a farmakologickém výzkumu.
In vitro se buňky BT-20 používají ke studiu mechanismů proliferace, migrace a invaze nádorových buněk. Používají se také k hodnocení cytotoxicity chemoterapeutických látek, což z nich činí klíčové buňky pro preklinické testování protinádorových léčiv. Přizpůsobivost buněk BT-20 různým kultivačním podmínkám a jejich robustní růst in vitro z nich činí cenný zdroj pro výzkumné laboratoře zaměřené na základní mechanismy rakoviny prsu a vývoj nových terapeutických strategií.
- Tkáň
- Prsa, mléčná žláza
- Nemoc
- Invazivní duktální karcinom
- Synonyma
- BT 20
- BT20
02Klasifikace
- Organismus
- Člověk
- Sex
- Žena
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Morfologie
- Epitelu podobné
- Tumorogenní
- Ano, na nahých myších. Tvoří adenokarcinomy II. stupně
- Karyotyp
- Modální číslo = 50, mnoho markerů s velkými subtelocentrickými znaky. (P87) Hyperdiploidní s abnormalitami včetně fragmentovaných chromozomů, zlomů, sekundárních zúžení, translokací, submetacentrických a telocentrických markerů
04Identifikátory
- Citace
- BT-20 (katalogové číslo Cytion 300130)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0178
05Exprese a náchylnost
- Exprese antigenu
- HLA A1, Bw16 (+/-)
- Isoenzymy
- PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Fenotyp Frekvence produktu: 0.0115
- Onkogeny
- Wnt4 +, wnt7h +
- Mutační profil
- Mutace TP53
- Reverzní transkriptáza
- Negativní
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Hustota výsevu
- 1 x 104 buněk/cm2 vytvoří konfluentní vrstvu za přibližně 6 dní.
- Obnova tekutin
- 2 až 3krát týdně
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Věk dárce
- 74 let
- Etnická příslušnost
- Kavkazský
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano
