Preskoči na vsebino
Celice BT-20
Tkivo
Prsi, mlečna žleza
Bolezen
Invazivni duktalni karcinom
Sinonimi
BT 20, BT20

Dokumenti

Celice BT-20

Cell line · Številka izdelka 300130

Celična linija BT-20 je celična linija človeškega adenokarcinoma dojke, ki je bila vzpostavljena leta 1958 iz malignega tkiva 74-letne ženske kavkazske rase...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija BT-20 je celična linija človeškega adenokarcinoma dojke, ki so jo leta 1958 ustvarili iz malignega tkiva 74-letne kavkaške pacientke. Ta celična linija ima morfologijo, podobno epitelijski, in se pogosto uporablja v raziskavah, ki se osredotočajo na biologijo raka dojk, zlasti v študijah, ki preučujejo hormonsko uravnavanje rasti raka, izražanje genov in učinkovitost terapevtskih sredstev proti raku dojk.

Za celice BT-20 je značilno, da lahko tvorijo tumorje, ko jih vsadijo v imunokompromitirane miši, in tako služijo kot uporaben model in vivo za raka dojk. Te celice izražajo receptorje za estrogen, progesteron in androgen, zaradi česar so pomembne za študije poti hormonskega odziva. Poleg tega je genetska analiza celic BT-20 razkrila mutacije v genih, kot sta TP53 in PIK3CA, ki so pogosti pri raku dojk, kar podpira njihovo uporabo v genetskih in farmakoloških raziskavah.

In vitro se celice BT-20 uporabljajo za preučevanje mehanizmov proliferacije, migracije in invazije rakavih celic. Uporabljajo se tudi za ocenjevanje citotoksičnosti kemoterapevtikov, zato so ključnega pomena za predklinično testiranje zdravil proti raku. Zaradi prilagodljivosti celic BT-20 različnim pogojem gojenja in njihove močne rasti in vitro so dragocen vir za laboratorije za raziskave raka, ki se osredotočajo na osnovne mehanizme raka dojk in razvoj novih terapevtskih strategij.

Tkivo
Prsi, mlečna žleza
Bolezen
Invazivni duktalni karcinom
Sinonimi
  • BT 20
  • BT20

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših. Oblikuje adenokarcinome stopnje II
Kariotip
Modalno število = 50, veliko označevalcev z velikimi subtelocentriki, ki so najbolj značilni. (P87) Hiperdiploidni z nepravilnostmi, vključno s fragmentiranimi kromosomi, prekinitvami, sekundarnimi zožitvami, translokacijami, submetacentričnimi in telocentričnimi označevalci

04Identifikatorji

Navajanje vira
BT-20 (Cytionova kataloška številka 300130)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0178

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
HLA A1, Bw16 (+/-)
Izoenzimi
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Fenotip Pogostost izdelka: 0.0115
Onkogeni
Wnt4 +, wnt7h +
Profil mutacij
TP53 mut
Reversna transkriptaza
Negativni

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2 bo v približno 6 dneh tvorilo konfluentno plast.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
74 let
Etnična pripadnost
Kavkaški