İçeriğe atla
BT-20 Hücreleri
Doku
Meme, meme bezi
Hastalık
İnvaziv duktal karsinom
Eş anlamlılar
BT 20, BT20

BT-20 Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300130

BT-20 hücre hattı, 1958 yılında 74 yaşındaki Kafkas kökenli bir kadının malign dokusundan elde edilen bir insan meme adenokarsinomu hücre hattıdır...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

BT-20 hücre hattı, 1958 yılında 74 yaşındaki Kafkasyalı bir kadın hastanın malign dokusundan oluşturulan bir insan meme adenokarsinom hücre hattıdır. Bu hücre hattı epitel benzeri morfoloji sergiler ve meme kanseri biyolojisine odaklanan araştırmalarda, özellikle de kanser büyümesinin hormonal düzenlemesini, gen ifadesini ve meme kanserine karşı terapötik ajanların etkinliğini araştıran çalışmalarda sıklıkla kullanılır.

BT-20 hücreleri, bağışıklık sistemi baskılanmış farelere implante edildiğinde tümör oluşturma yetenekleri ile karakterize edilir ve böylece meme kanseri için yararlı bir in vivo model olarak hizmet eder. Bu hücreler östrojen, progesteron ve androjen reseptörlerini eksprese ederek hormon yanıt yolları üzerine yapılan çalışmalar için uygun hale getirmektedir. Ayrıca BT-20 hücrelerinin genetik analizi, meme kanserinde yaygın olan TP53 ve PIK3CA gibi genlerdeki mutasyonları ortaya çıkararak genetik ve farmakolojik araştırmalarda kullanımlarını desteklemiştir.

BT-20 hücreleri in vitro olarak kanser hücresi proliferasyonu, migrasyonu ve invazyonu mekanizmalarını incelemek için kullanılır. Ayrıca kemoterapi ajanlarının sitotoksisitesini değerlendirmek için de kullanılırlar, bu da onları anti-kanser ilaçlarının klinik öncesi testleri için kritik hale getirir. BT-20 hücrelerinin çeşitli kültür koşullarına uyarlanabilirliği ve in vitro ortamda güçlü bir şekilde büyümesi, onları meme kanserinin altında yatan mekanizmalara ve yeni terapötik stratejilerin geliştirilmesine odaklanan kanser araştırma laboratuvarları için değerli bir kaynak haline getirmektedir.

Doku
Meme, meme bezi
Hastalık
İnvaziv duktal karsinom
Eş anlamlılar
  • BT 20
  • BT20

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde. Derece II adenokarsinomlar oluşturur
Karyotip
Modal sayı = 50, büyük subtelosentriklere sahip birçok belirteç en karakteristiktir. (P87) Parçalanmış kromozomlar, kırıklar, ikincil daralmalar, translokasyonlar, submetasentrik ve telosentrik belirteçler gibi anormallikler içeren hiperdiploid

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
BT-20 (Cytion katalog numarası 300130)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0178

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
HLA A1, Bw16 (+/-)
İzoenzimler
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Fenotip Frekans Ürünü: 0.0115
Onkogenler
Wnt4 +, wnt7h +
Mutasyon profili
TP53 mut
Ters transkriptaz
Negatif

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2 yaklaşık 6 gün içinde birleşik bir tabaka oluşturacaktır.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
74 yıl
Etnik köken
Kafkas