Gå til innholdet
BT-20-celler
Vev
Bryst, brystkjertel
Sykdom
Invasivt duktalt karsinom
Synonymer
BT 20, BT20

Dokumenter

BT-20-celler

Cell line · Produktnummer 300130

BT-20-cellelinjen er en human adenokarsinomcellelinje fra brystet som ble etablert i 1958 fra ondartet vev fra en 74 år gammel kaukasisk kvinne...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

BT-20-cellelinjen er en human brystkreftcellelinje som ble etablert i 1958 fra ondartet vev fra en 74 år gammel kaukasisk kvinnelig pasient. Denne cellelinjen har en epitel-lignende morfologi og brukes ofte i forskning som fokuserer på brystkreftbiologi, særlig i studier som undersøker hormonell regulering av kreftvekst, genuttrykk og effekten av terapeutiske midler mot brystkreft.

BT-20-celler kjennetegnes ved at de er i stand til å danne svulster når de implanteres i mus med svekket immunforsvar, og fungerer dermed som en nyttig in vivo-modell for brystkreft. Disse cellene uttrykker reseptorer for østrogen, progesteron og androgen, noe som gjør dem relevante for studier av hormonresponsveier. I tillegg har genetiske analyser av BT-20-celler avdekket mutasjoner i gener som TP53 og PIK3CA, som er vanlige ved brystkreft, noe som støtter bruken av dem i genetisk og farmakologisk forskning.

In vitro brukes BT-20-celler til å studere mekanismene bak kreftcellers spredning, migrasjon og invasjon. De brukes også til å vurdere cytotoksisiteten til cellegift, noe som gjør dem avgjørende for preklinisk testing av kreftlegemidler. BT-20-cellenes tilpasningsevne til ulike dyrkingsforhold og deres robuste vekst in vitro gjør dem til en verdifull ressurs for kreftforskningslaboratorier som fokuserer på de underliggende mekanismene bak brystkreft og utvikling av nye behandlingsstrategier.

Vev
Bryst, brystkjertel
Sykdom
Invasivt duktalt karsinom
Synonymer
  • BT 20
  • BT20

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus. Danner adenokarsinomer av grad II
Karyotype
Modalt antall = 50, mange markører med store subtelosentriker mest karakteristisk. (P87) Hyperdiploid med abnormaliteter som fragmenterte kromosomer, brudd, sekundære innsnevringer, translokasjoner, submetacentriske og telosentriske markører

04Identifikatorer

Kildehenvisning
BT-20 (Cytion-katalognummer 300130)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0178

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
HLA A1, Bw16 (+/-)
Isoenzymer
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Fenotypefrekvensprodukt: 0.0115
Onkogener
Wnt4 +, wnt7h +
Mutasjonsprofil
TP53 mut
Revers transkriptase
Negativ

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2 vil gi et sammenvokst lag på omtrent 6 dager.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
74 år
Etnisitet
Kaukasisk