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Células BT-20
Tecido
Mama, glândula mamária
Doença
Carcinoma ductal invasivo
Sinónimos
BT 20, BT20

Documentos

Células BT-20

Cell line · Número do produto 300130

A linha celular BT-20 é uma linha celular de adenocarcinoma mamário humano que foi criada em 1958 a partir do tecido maligno de uma mulher caucasiana de 74 anos...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular BT-20 é uma linha celular de adenocarcinoma da mama humano que foi criada em 1958 a partir do tecido maligno de uma doente caucasiana de 74 anos. Esta linha celular apresenta uma morfologia semelhante à epitelial e é frequentemente utilizada na investigação centrada na biologia do cancro da mama, nomeadamente em estudos que exploram a regulação hormonal do crescimento do cancro, a expressão genética e a eficácia dos agentes terapêuticos contra o cancro da mama.

As células BT-20 caracterizam-se pela sua capacidade de formar tumores quando implantadas em ratinhos imunocomprometidos, servindo assim de modelo in vivo útil para o cancro da mama. Estas células expressam receptores para estrogénio, progesterona e androgénio, o que as torna relevantes para estudos sobre as vias de resposta hormonal. Além disso, a análise genética das células BT-20 revelou mutações em genes como o TP53 e o PIK3CA, que são comuns no cancro da mama, apoiando a sua utilização na investigação genética e farmacológica.

In vitro, as células BT-20 são utilizadas para estudar os mecanismos de proliferação, migração e invasão das células cancerosas. São também utilizadas para avaliar a citotoxicidade dos agentes de quimioterapia, o que as torna essenciais para os ensaios pré-clínicos de medicamentos anticancerígenos. A adaptabilidade das células BT-20 a várias condições de cultura e o seu crescimento robusto in vitro tornam-nas um recurso valioso para os laboratórios de investigação do cancro que se concentram nos mecanismos subjacentes ao cancro da mama e no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas.

Tecido
Mama, glândula mamária
Doença
Carcinoma ductal invasivo
Sinónimos
  • BT 20
  • BT20

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus. Forma adenocarcinomas de grau II
Cariótipo
Número modal = 50, muitos marcadores com subtelocêntricos grandes são os mais caraterísticos. (P87) Hiperdiplóide com anomalias incluindo cromossomas fragmentados, quebras, constrições secundárias, translocações, marcadores submetacêntricos e telocêntricos

04Identificadores

Referência
BT-20 (número de catálogo Cytion 300130)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0178

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
HLA A1, Bw16 (+/-)
Isoenzimas
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Produto de frequência fenotípica: 0.0115
Oncogenes
Wnt4 +, wnt7h +
Perfil mutacional
TP53 mut
Transcriptase reversa
Negativo

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm² produzirá uma camada confluente em cerca de 6 dias
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
74 anos
Etnia
Caucasiano