Gå direkte til indholdet
BT-20-celler
Væv
Bryst, brystkirtel
Sygdom
Invasivt duktalt karcinom
Synonymer
BT 20, BT20

Dokumenter

BT-20-celler

Cell line · Varenummer 300130

BT-20-cellelinjen er en human adenokarcinomcellelinje fra brystet, der blev etableret i 1958 ud fra det maligne væv fra en 74-årig kaukasisk kvinde...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

BT-20-cellelinjen er en human adenokarcinomcellelinje, der blev etableret i 1958 fra ondartet væv fra en 74-årig kaukasisk kvinde. Denne cellelinje har en epitellignende morfologi og bruges ofte i forskning med fokus på brystkræftbiologi, især i undersøgelser, der udforsker den hormonelle regulering af kræftvækst, genekspression og effekten af terapeutiske midler mod brystkræft.

BT-20-celler er kendetegnet ved deres evne til at danne tumorer, når de implanteres i immunkompromitterede mus, og fungerer dermed som en nyttig in vivo-model for brystkræft. Disse celler udtrykker receptorer for østrogen, progesteron og androgen, hvilket gør dem relevante for undersøgelser af hormonresponsveje. Derudover har genetisk analyse af BT-20-celler afsløret mutationer i gener som TP53 og PIK3CA, som er almindelige i brystkræft, hvilket understøtter deres anvendelse i genetisk og farmakologisk forskning.

In vitro bruges BT-20-celler til at studere mekanismerne bag kræftcellers spredning, migration og invasion. De bruges også til at vurdere cytotoksiciteten af kemoterapimidler, hvilket gør dem afgørende for præklinisk testning af lægemidler mod kræft. BT-20-cellernes tilpasningsevne til forskellige dyrkningsforhold og deres robuste vækst in vitro gør dem til en værdifuld ressource for kræftforskningslaboratorier, der fokuserer på de underliggende mekanismer for brystkræft og udviklingen af nye terapeutiske strategier.

Væv
Bryst, brystkirtel
Sygdom
Invasivt duktalt karcinom
Synonymer
  • BT 20
  • BT20

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus. Danner adenokarcinomer af grad II
Karyotype
Modalt antal = 50, mange markører med store subtelocentriske markører mest karakteristiske. (P87) Hyperdiploid med abnormiteter, herunder fragmenterede kromosomer, brud, sekundære indsnævringer, translokationer, submetacentriske og telocentriske markører

04Identifikatorer

Kildehenvisning
BT-20 (Cytion katalognummer 300130)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0178

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
HLA A1, Bw16 (+/-)
Isoenzymer
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Fænotypefrekvensprodukt: 0.0115
Onkogener
Wnt4 +, wnt7h +
Mutationsprofil
TP53 mut
Revers transkriptase
Negativ

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2 vil danne et sammenhængende lag på ca. 6 dage.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
74 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk