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Celle BT-20
Tessuto
Seno, ghiandola mammaria
Malattia
Carcinoma duttale invasivo
Sinonimi
BT 20, BT20

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Celle BT-20

Cell line · Codice prodotto 300130

La linea cellulare BT-20 è una linea cellulare di adenocarcinoma mammario umano, ottenuta nel 1958 dal tessuto maligno di una donna caucasica di 74 anni...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare BT-20 è una linea cellulare di adenocarcinoma mammario umano creata nel 1958 a partire dal tessuto maligno di una paziente caucasica di 74 anni. Questa linea cellulare presenta una morfologia simile a quella epiteliale ed è spesso utilizzata nella ricerca sulla biologia del cancro al seno, in particolare negli studi che esplorano la regolazione ormonale della crescita del cancro, l'espressione genica e l'efficacia degli agenti terapeutici contro il cancro al seno.

Le cellule BT-20 sono caratterizzate dalla capacità di formare tumori quando vengono impiantate in topi immunocompromessi, fungendo così da utile modello in vivo per il cancro al seno. Queste cellule esprimono recettori per gli estrogeni, il progesterone e gli androgeni, il che le rende importanti per gli studi sulle vie di risposta ormonale. Inoltre, l'analisi genetica delle cellule BT-20 ha rivelato mutazioni in geni come TP53 e PIK3CA, che sono comuni nel cancro al seno, supportando il loro uso nella ricerca genetica e farmacologica.

In vitro, le cellule BT-20 sono utilizzate per studiare i meccanismi di proliferazione, migrazione e invasione delle cellule tumorali. Sono anche impiegate per valutare la citotossicità degli agenti chemioterapici, il che le rende fondamentali per la sperimentazione preclinica di farmaci antitumorali. L'adattabilità delle cellule BT-20 a varie condizioni di coltura e la loro robusta crescita in vitro le rendono una risorsa preziosa per i laboratori di ricerca sul cancro che si concentrano sui meccanismi alla base del cancro al seno e sullo sviluppo di nuove strategie terapeutiche.

Tessuto
Seno, ghiandola mammaria
Malattia
Carcinoma duttale invasivo
Sinonimi
  • BT 20
  • BT20

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi. Forma adenocarcinomi di grado II
Cariotipo
Numero modale = 50, molti marcatori con grandi subtelocentri come caratteristica principale. (P87) Iperdiploide con anomalie che includono cromosomi frammentati, rotture, costrizioni secondarie, traslocazioni, marcatori submetacentrici e telocentrici

04Identificatori

Riferimento bibliografico
BT-20 (numero di catalogo Cytion 300130)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0178

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
HLA A1, Bw16 (+/-)
Isoenzimi
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Prodotto di frequenza del fenotipo: 0.0115
Oncogeni
Wnt4 +, wnt7h +
Profilo mutazionale
TP53 mut
Trascriptasi inversa
Negativo

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2 produrrà uno strato confluente in circa 6 giorni
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
74 anni
Etnia
Caucasico