Siirry sisältöön
BT-20-kennot
Kudos
Rinta, rintarauhanen
Sairaus
Invasiivinen duktaalikarsinooma
Synonyymit
BT 20, BT20

Asiakirjat

BT-20-kennot

Cell line · Tuotenumero 300130

BT-20-solulinja on ihmisen rintasyövän adenokarsinooma-solulinja, joka perustettiin vuonna 1958 74-vuotiaan valkoihoisen naispotilaan pahanlaatuisesta kudoksesta...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

BT-20-solulinja on ihmisen rintojen adenokarsinooma-solulinja, joka perustettiin vuonna 1958 74-vuotiaan valkoihoisen naispotilaan pahanlaatuisesta kudoksesta. Tällä solulinjalla on epiteelin kaltainen morfologia, ja sitä käytetään usein rintasyövän biologiaan keskittyvässä tutkimuksessa, erityisesti tutkimuksissa, joissa selvitetään syövän kasvun hormonaalista säätelyä, geeniekspressiota ja rintasyöpään kohdistuvien terapeuttisten aineiden tehoa.

BT-20-soluille on ominaista niiden kyky muodostaa kasvaimia, kun ne istutetaan immuunipuutteisiin hiiriin, ja ne toimivat siten hyödyllisenä rintasyövän in vivo -mallina. Nämä solut ilmentävät estrogeeni-, progesteroni- ja androgeenireseptoreita, minkä vuoksi ne ovat merkityksellisiä hormonivasteiden tutkimuksessa. Lisäksi BT-20-solujen geneettisessä analyysissä on havaittu mutaatioita esimerkiksi TP53- ja PIK3CA-geeneissä, jotka ovat yleisiä rintasyövässä, mikä tukee niiden käyttöä geneettisessä ja farmakologisessa tutkimuksessa.

In vitro BT-20-soluja käytetään syöpäsolujen proliferaation, migraation ja invaasion mekanismien tutkimiseen. Niitä käytetään myös kemoterapia-aineiden sytotoksisuuden arviointiin, minkä vuoksi ne ovat kriittisiä syöpälääkkeiden prekliinisessä testauksessa. BT-20-solujen sopeutumiskyky erilaisiin viljelyolosuhteisiin ja niiden vankka in vitro -kasvu tekevät niistä arvokkaan resurssin syöpätutkimuslaboratorioille, jotka keskittyvät rintasyövän taustalla oleviin mekanismeihin ja uusien hoitostrategioiden kehittämiseen.

Kudos
Rinta, rintarauhanen
Sairaus
Invasiivinen duktaalikarsinooma
Synonyymit
  • BT 20
  • BT20

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä. Muodostaa II asteen adenokarsinoomia
Karyotyyppi
Modaaliluku = 50, tyypillisimpiä ovat monet markkerit, joissa on suuret subtelosentriset merkit. (P87) Hyperdiploidinen, poikkeavuuksia, mukaan lukien pirstaleiset kromosomit, katkokset, sekundaariset supistumat, translokaatiot, submetasentriset ja telosentriset markkerit

04Tunnisteet

Lähdeviite
BT-20 (Cytionin luettelonumero 300130)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0178

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
HLA A1, Bw16 (+/-)
Isoentsyymit
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Fenotyypin frekvenssituote: 0.0115
Onkogeenit
Wnt4 +, wnt7h +
Mutaatioprofiili
TP53 mut
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2 tuottaa konfluenttisen kerroksen noin 6 päivässä.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
74 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen