Prejsť na obsah
Bunky BT-20
Tkanivo
Prsia, mliečna žľaza
Choroba
Invazívny duktálny karcinóm
Synonymá
BT 20, BT20

Dokumenty

Bunky BT-20

Cell line · Číslo výrobku 300130

Bunka BT-20 je bunková línia ľudského adenokarcinómu prsníka, ktorá bola izolovaná v roku 1958 z malígneho tkaniva 74-ročnej ženy kaukazského pôvodu...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia BT-20 je bunková línia ľudského adenokarcinómu prsníka, ktorá bola vytvorená v roku 1958 z malígneho tkaniva 74-ročnej kaukazskej pacientky. Táto bunková línia vykazuje morfológiu podobnú epitelu a často sa používa vo výskume zameranom na biológiu rakoviny prsníka, najmä v štúdiách skúmajúcich hormonálnu reguláciu rastu rakoviny, expresiu génov a účinnosť terapeutických látok proti rakovine prsníka.

Bunky BT-20 sa vyznačujú schopnosťou vytvárať nádory po implantácii do imunokompromitovaných myší, čím slúžia ako užitočný model rakoviny prsníka in vivo. Tieto bunky exprimujú receptory pre estrogén, progesterón a androgén, vďaka čomu sú vhodné na štúdium dráh hormonálnej odpovede. Okrem toho genetická analýza buniek BT-20 odhalila mutácie v génoch ako TP53 a PIK3CA, ktoré sú bežné pri rakovine prsníka, čo podporuje ich využitie v genetickom a farmakologickom výskume.

Bunky BT-20 sa in vitro používajú na štúdium mechanizmov proliferácie, migrácie a invázie rakovinových buniek. Využívajú sa aj na hodnotenie cytotoxicity chemoterapeutík, vďaka čomu sú veľmi dôležité na predklinické testovanie protinádorových liekov. Vďaka prispôsobivosti buniek BT-20 rôznym kultivačným podmienkam a ich robustnému rastu in vitro sú cenným zdrojom pre laboratóriá zaoberajúce sa výskumom rakoviny, ktoré sa zameriavajú na základné mechanizmy rakoviny prsníka a vývoj nových terapeutických stratégií.

Tkanivo
Prsia, mliečna žľaza
Choroba
Invazívny duktálny karcinóm
Synonymá
  • BT 20
  • BT20

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, na nahých myšiach. Vytvára adenokarcinómy II. stupňa
Karyotyp
Modálne číslo = 50, mnoho markerov s veľkými subtelocentrickými znakmi. (P87) Hyperdiploidný s abnormalitami vrátane fragmentovaných chromozómov, zlomov, sekundárnych zúžení, translokácií, submetacentrických a telocentrických markerov

04Identifikátory

Citácia
BT-20 (katalógové číslo Cytion 300130)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0178

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
HLA A1, Bw16 (+/-)
Izoenzýmy
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Produkt frekvencie fenotypu: 0.0115
Onkogény
Wnt4 +, wnt7h +
Mutčný profil
Mutácia TP53
Reverzná transkriptáza
Negatívne

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2 vytvorí konfluentnú vrstvu za približne 6 dní.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
74 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský