
- Tissue
- Útero, cuello uterino
- Disease
- Carcinoma epidermoide
- Metastatic site
- Omento
- Synonyms
- Me-180, ME 180, ME180
Documents
01General information
- Description
La línea celular ME-180 es una línea celular epitelial establecida a partir de un carcinoma de células escamosas altamente invasivo, aislado originalmente de una metástasis omental de un carcinoma cervical en una paciente blanca de 66 años. El carcinoma se caracterizaba por agrupaciones celulares irregulares sin queratinización significativa y con necrosis mínima. Esta línea celular es particularmente importante para la investigación del cáncer, especialmente en estudios relacionados con el cáncer de cuello uterino y otras formas de carcinoma de células escamosas, debido a su origen y naturaleza agresiva. Las células ME-180 son tumorigénicas y se ha demostrado que forman carcinomas epidermoides bien diferenciados cuando se implantan en ratones desnudos.
Las células ME-180 presentan varias propiedades únicas, entre ellas un cariotipo heteroploide con un modo subtriploide, lo que indica una disposición cromosómica inestable. Las células presentan una morfología epitelial típica con numerosos desmosomas y tonofibrillas, y no muestran inhibición por contacto, lo que a menudo conduce a un crecimiento en capas en cultivo. El crecimiento de la línea celular se ve inhibido por el factor de necrosis tumoral alfa (TNF alfa), lo que la hace útil para estudios que investigan los efectos de las citocinas inflamatorias en las células tumorales. Además, las células ME-180 contienen ADN del virus del papiloma humano (VPH), con una mayor homología con el VPH-68 en comparación con el VPH-18, lo que podría ser relevante para estudios sobre la carcinogénesis relacionada con el VPH.
Las células ME-180 también son valiosas en la investigación de enfermedades infecciosas debido a su sensibilidad a diversos virus. La línea celular se ha utilizado para estudiar la interacción con varios virus, entre ellos la influenza y los mixovirus. Las células ME-180 han demostrado la capacidad de desarrollar infecciones persistentes con algunos mixovirus, lo que las convierte en un modelo útil para estudiar la latencia viral y los efectos a largo plazo de la infección viral en las células cancerosas. La combinación de su origen canceroso, su susceptibilidad viral y sus características específicas de crecimiento hacen de la ME-180 una herramienta versátil tanto en la investigación oncológica como en la virológica.
- Tissue
- Útero, cuello uterino
- Disease
- Carcinoma epidermoide
- Metastatic site
- Omento
- Synonyms
- Me-180
- ME 180
- ME180
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Cell type
- Epithelial
04Identifiers
- Citation
- ME-180 (número de catálogo de Cytion 300196)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1401
05Expression and susceptibility
- Viruses
- Positivo para el VPH68
06Handling and culture
- Culture medium
- McCoys 5a, p: 3,0 g/L de glucosa, p: glutamina estable, p: 2,0 mM de piruvato de sodio, p: 2,2 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820200a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Seeding density
- 1 x 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Post-thaw recovery
- Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Donor age
- 66 años
- Ethnicity
- caucásico
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes