Przejdź do treści
Komórki ME-180
Chusteczka
Macica, szyjka macicy
Choroba
Rak naskórka
Miejsce przerzutów
Omentum
Synonimy
Me-180, ME 180, ME180

Dokumenty

Komórki ME-180

Cell line · Numer produktu 300196

Linia komórkowa ME-180 to linia komórek nabłonkowych wyhodowana z wysoce inwazyjnego raka płaskonabłonkowego, pierwotnie wyizolowanego z przerzutów w sieci...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa ME-180 jest nabłonkową linią komórkową utworzoną z wysoce inwazyjnego raka płaskonabłonkowego, pierwotnie wyizolowanego z przerzutu raka szyjki macicy do omentala u 66-letniej białej pacjentki. Rak charakteryzował się nieregularnymi skupiskami komórek bez znaczącego rogowacenia i minimalną martwicą. Ta linia komórkowa jest szczególnie istotna dla badań nad rakiem, zwłaszcza w badaniach obejmujących raka szyjki macicy i inne formy raka płaskonabłonkowego, ze względu na jej pochodzenie i agresywny charakter. Komórki ME-180 są nowotworowe i wykazano, że tworzą dobrze zróżnicowane raki naskórka po wszczepieniu do nagich myszy.

Komórki ME-180 mają kilka unikalnych właściwości, w tym heteroploidalny kariotyp z trybem subtriploidalnym, co wskazuje na niestabilny układ chromosomów. Komórki wykazują typową morfologię nabłonkową z licznymi desmosomami i tonofibrylami i nie wykazują zahamowania kontaktu, często prowadząc do warstwowego wzrostu w hodowli. Wzrost linii komórkowej jest hamowany przez czynnik martwicy nowotworów alfa (TNF alfa), co czyni ją użyteczną w badaniach nad wpływem cytokin zapalnych na komórki nowotworowe. Dodatkowo, komórki ME-180 zawierają DNA wirusa brodawczaka ludzkiego (HPV), z wyższą homologią do HPV-68 w porównaniu do HPV-18, co może być istotne w badaniach nad kancerogenezą związaną z HPV.

Komórki ME-180 są również cenne w badaniach nad chorobami zakaźnymi ze względu na ich wrażliwość na różne wirusy. Linia komórkowa została wykorzystana do badania interakcji z kilkoma wirusami, w tym wirusami grypy i myksowirusami. Komórki ME-180 wykazały zdolność do tworzenia trwałych infekcji niektórymi myksowirusami, co czyni je użytecznym modelem do badania latencji wirusowej i długoterminowych skutków infekcji wirusowej na komórkach nowotworowych. Połączenie nowotworowego pochodzenia, podatności na wirusy i specyficznych cech wzrostu sprawia, że ME-180 jest wszechstronnym narzędziem zarówno w badaniach onkologicznych, jak i wirusologicznych.

Chusteczka
Macica, szyjka macicy
Choroba
Rak naskórka
Miejsce przerzutów
Omentum
Synonimy
  • Me-180
  • ME 180
  • ME180

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Typ komórki
Nabłonek

04Identyfikatory

Źródło
ME-180 (numer katalogowy Cytion 300196)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1401

05Ekspresja i podatność

Wirusy
HPV68 dodatni

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukozy, w: stabilna glutamina, w: 2,0 mM pirogronianu sodu, w: 2,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820200a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
66 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski