Mine otse sisu juurde
ME-180 rakud
Kude
Emakas, emakakael
Haigus
Epidermoidne kartsinoom
Metastaaside asukoht
Omentum
Sünonüümid
Me-180, ME 180, ME180

Dokumendid

ME-180 rakud

Cell line · Toote number 300196

Rakuliin ME-180 on epiteelrakkude liin, mis on saadud väga invasiivsest lamerakk-kartsinoomist, mis isoleeriti algselt omentaalsest metastaasist...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

ME-180 rakuliin on epiteelirakuliin, mis on loodud väga invasiivsest laasirakk-kartsinoomist, mis on algselt isoleeritud 66-aastase valge naissoost patsiendi emakakaelavähi omentaalmetastaasist. Kartsinoomile olid iseloomulikud ebakorrapärased rakukobarad, millel puudus märkimisväärne keratiniseerumine ja minimaalne nekroos. See rakuliin on eriti oluline vähiuuringute jaoks, eriti emakakaelavähki ja muid plaatinakartsinoomi vorme hõlmavates uuringutes, selle päritolu ja agressiivse iseloomu tõttu. ME-180 rakud on tumorigeensed ja on näidatud, et nad moodustavad hästi diferentseerunud epidermoidseid kartsinoome, kui neid implanteeritakse alasti hiirtele.

ME-180 rakkudel on mitmeid unikaalseid omadusi, sealhulgas heteroploidne karüotüüp subtriploidse režiimiga, mis viitab ebastabiilsele kromosoomide paigutusele. Rakkudel on tüüpiline epiteeli morfoloogia koos arvukate desmosoomide ja tonofibrillidega ning neil ei esine kontaktinhibeerimist, mis viib kultuuris sageli kihilise kasvuni. Rakuliini kasvu inhibeerib tuumornekroosifaktor alfa (TNF alfa), mistõttu on see kasulik uuringutes, kus uuritakse põletikuliste tsütokiinide mõju kasvajarakkudele. Lisaks sellele sisaldavad ME-180 rakud inimese papilloomiviiruse (HPV) DNA-d, millel on suurem homoloogia HPV-68 suhtes võrreldes HPV-18-ga, mis võib olla oluline HPV-ga seotud kantserogeneesi uuringutes.

ME-180 rakud on väärtuslikud ka nakkushaiguste uurimisel nende tundlikkuse tõttu erinevate viiruste suhtes. Seda rakuliini on kasutatud mitmete viiruste, sealhulgas gripi- ja müksoviiruste koostoime uurimiseks. ME-180 rakud on näidanud võimet moodustada püsivaid infektsioone mõnede müksoviirustega, mistõttu on nad kasulikud mudeliks viirusliku latentsuse ja viirusinfektsiooni pikaajalise mõju uurimiseks vähirakkudele. Vähi päritolu, viiruse vastuvõtlikkuse ja spetsiifiliste kasvutunnuste kombinatsioon teeb ME-180 mitmekülgseks vahendiks nii onkoloogilistes kui ka viroloogilistes uuringutes.

Kude
Emakas, emakakael
Haigus
Epidermoidne kartsinoom
Metastaaside asukoht
Omentum
Sünonüümid
  • Me-180
  • ME 180
  • ME180

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteel

04Tunnused

Viide
ME-180 (Cytioni katalooginumber 300196)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1401

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
HPV68 positiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
McCoys 5a, w: 3,0 g/L glükoos, w: stabiilne glutamiin, w: 2,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820200a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
66 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia