Vai al contenuto
Cellule ME-180
Tessuto
Utero, cervice
Malattia
Carcinoma epidermoide
Sito metastatico
Omento
Sinonimi
Me-180, ME 180, ME180

Documenti

Cellule ME-180

Cell line · Codice prodotto 300196

La linea cellulare ME-180 è una linea cellulare epiteliale derivata da un carcinoma a cellule squamose altamente invasivo, originariamente isolato da una metastasi omentale...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse
Disponibile
Lotto
Consigliati (partita più recente)
  • CoA
  • CoA
1

01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare ME-180 è una linea cellulare epiteliale ottenuta da un carcinoma a cellule squamose altamente invasivo, originariamente isolato dalla metastasi omentale di un carcinoma cervicale in una paziente bianca di 66 anni. Il carcinoma era caratterizzato da ammassi di cellule irregolari, senza cheratinizzazione significativa e con necrosi minima. Questa linea cellulare è particolarmente significativa per la ricerca sul cancro, soprattutto negli studi che coinvolgono il cancro cervicale e altre forme di carcinoma a cellule squamose, a causa della sua origine e della sua natura aggressiva. Le cellule ME-180 sono tumorigeniche e hanno dimostrato di formare carcinomi epidermoidi ben differenziati quando vengono impiantate in topi nudi.

Le cellule ME-180 presentano diverse proprietà uniche, tra cui un cariotipo eteroploide con una modalità subtriploide, che indica una disposizione cromosomica instabile. Le cellule presentano una tipica morfologia epiteliale con numerosi desmosomi e tonofibrille e non presentano inibizione da contatto, portando spesso a una crescita stratificata in coltura. La crescita di questa linea cellulare è inibita dal fattore di necrosi tumorale alfa (TNF alfa), il che la rende utile per gli studi sugli effetti delle citochine infiammatorie sulle cellule tumorali. Inoltre, le cellule ME-180 contengono il DNA del papillomavirus umano (HPV), con una maggiore omologia con l'HPV-68 rispetto all'HPV-18, che potrebbe essere rilevante per gli studi sulla carcinogenesi legata all'HPV.

Le cellule ME-180 sono preziose anche per la ricerca sulle malattie infettive, grazie alla loro sensibilità a vari virus. La linea cellulare è stata utilizzata per studiare l'interazione con diversi virus, tra cui l'influenza e i myxovirus. Le cellule ME-180 hanno dimostrato la capacità di formare infezioni persistenti con alcuni myxovirus, rendendole un modello utile per studiare la latenza virale e gli effetti a lungo termine dell'infezione virale sulle cellule tumorali. La combinazione di origine cancerosa, suscettibilità virale e caratteristiche di crescita specifiche rende ME-180 uno strumento versatile per la ricerca in oncologia e virologia.

Tessuto
Utero, cervice
Malattia
Carcinoma epidermoide
Sito metastatico
Omento
Sinonimi
  • Me-180
  • ME 180
  • ME180

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
ME-180 (numero di catalogo Cytion 300196)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1401

05Espressione e suscettibilità

Virus
HPV68 positivo

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glucosio, w: Glutammina stabile, w: 2,0 mM Sodio piruvato, w: 2,2 g/L NaHCO3 (articolo Cytion numero 820200a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
66 anni
Etnia
Caucasico