
- Tessuto
- Utero, cervice
- Malattia
- Carcinoma epidermoide
- Sito metastatico
- Omento
- Sinonimi
- Me-180, ME 180, ME180
Documenti
Cellule ME-180
Cell line · Codice prodotto 300196
La linea cellulare ME-180 è una linea cellulare epiteliale derivata da un carcinoma a cellule squamose altamente invasivo, originariamente isolato da una metastasi omentale...
Personalizzazione / Suggerimenti
- Cellule ME-180Cell line€430.00
01Informazioni generali
- Descrizione
La linea cellulare ME-180 è una linea cellulare epiteliale ottenuta da un carcinoma a cellule squamose altamente invasivo, originariamente isolato dalla metastasi omentale di un carcinoma cervicale in una paziente bianca di 66 anni. Il carcinoma era caratterizzato da ammassi di cellule irregolari, senza cheratinizzazione significativa e con necrosi minima. Questa linea cellulare è particolarmente significativa per la ricerca sul cancro, soprattutto negli studi che coinvolgono il cancro cervicale e altre forme di carcinoma a cellule squamose, a causa della sua origine e della sua natura aggressiva. Le cellule ME-180 sono tumorigeniche e hanno dimostrato di formare carcinomi epidermoidi ben differenziati quando vengono impiantate in topi nudi.
Le cellule ME-180 presentano diverse proprietà uniche, tra cui un cariotipo eteroploide con una modalità subtriploide, che indica una disposizione cromosomica instabile. Le cellule presentano una tipica morfologia epiteliale con numerosi desmosomi e tonofibrille e non presentano inibizione da contatto, portando spesso a una crescita stratificata in coltura. La crescita di questa linea cellulare è inibita dal fattore di necrosi tumorale alfa (TNF alfa), il che la rende utile per gli studi sugli effetti delle citochine infiammatorie sulle cellule tumorali. Inoltre, le cellule ME-180 contengono il DNA del papillomavirus umano (HPV), con una maggiore omologia con l'HPV-68 rispetto all'HPV-18, che potrebbe essere rilevante per gli studi sulla carcinogenesi legata all'HPV.
Le cellule ME-180 sono preziose anche per la ricerca sulle malattie infettive, grazie alla loro sensibilità a vari virus. La linea cellulare è stata utilizzata per studiare l'interazione con diversi virus, tra cui l'influenza e i myxovirus. Le cellule ME-180 hanno dimostrato la capacità di formare infezioni persistenti con alcuni myxovirus, rendendole un modello utile per studiare la latenza virale e gli effetti a lungo termine dell'infezione virale sulle cellule tumorali. La combinazione di origine cancerosa, suscettibilità virale e caratteristiche di crescita specifiche rende ME-180 uno strumento versatile per la ricerca in oncologia e virologia.
- Tessuto
- Utero, cervice
- Malattia
- Carcinoma epidermoide
- Sito metastatico
- Omento
- Sinonimi
- Me-180
- ME 180
- ME180
02Classificazione
- Organismo
- Umano
- Sesso
- Donna
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Livello di biosicurezza
- 2
03Caratteristiche
- Morfologia
- Simile all'epitelio
- Tipo di cellula
- Epiteliale
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- ME-180 (numero di catalogo Cytion 300196)
- Codice fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1401
05Espressione e suscettibilità
- Virus
- HPV68 positivo
06Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glucosio, w: Glutammina stabile, w: 2,0 mM Sodio piruvato, w: 2,2 g/L NaHCO3 (articolo Cytion numero 820200a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Densità di semina
- 1 x 104 cellule/cm2
- Rinnovo dei fluidi
- da 2 a 3 volte alla settimana
- Recupero post-scongelamento
- Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
08Donatore
- Età dei donatori
- 66 anni
- Etnia
- Caucasico
09Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì