
- Tissue
- Utérus, col de l'utérus
- Disease
- Carcinome épidermoïde
- Metastatic site
- Épiploon
- Synonyms
- Me-180, ME 180, ME180
Documents
01General information
- Description
La lignée cellulaire ME-180 est une lignée cellulaire épithéliale issue d’un carcinome épidermoïde hautement invasif, initialement isolé à partir d’une métastase omentale d’un carcinome du col de l’utérus chez une patiente de race blanche âgée de 66 ans. Le carcinome se caractérisait par des amas cellulaires irréguliers, sans kératinisation significative et présentant une nécrose minimale. Cette lignée cellulaire revêt une importance particulière pour la recherche sur le cancer, notamment dans les études portant sur le cancer du col de l’utérus et d’autres formes de carcinomes épidermoïdes, en raison de son origine et de sa nature agressive. Les cellules ME-180 sont tumorigènes et il a été démontré qu’elles formaient des carcinomes épidermoïdes bien différenciés lorsqu’elles étaient implantées chez des souris nues.
Les cellules ME-180 possèdent plusieurs propriétés uniques, notamment un caryotype hétéroploïde présentant un mode subtriploïde, ce qui indique une organisation chromosomique instable. Les cellules présentent une morphologie épithéliale typique avec de nombreux desmosomes et tonofibrilles, et elles ne manifestent pas d’inhibition de contact, ce qui conduit souvent à une croissance en couches en culture. La croissance de cette lignée cellulaire est inhibée par le facteur de nécrose tumorale alpha (TNF-alpha), ce qui la rend utile pour les études portant sur les effets des cytokines inflammatoires sur les cellules tumorales. De plus, les cellules ME-180 contiennent de l’ADN du virus du papillome humain (VPH), présentant une plus grande homologie avec le VPH-68 qu’avec le VPH-18, ce qui pourrait s’avérer pertinent pour les études sur la carcinogenèse liée au VPH.
Les cellules ME-180 sont également précieuses dans la recherche sur les maladies infectieuses en raison de leur sensibilité à divers virus. Cette lignée cellulaire a été utilisée pour étudier l’interaction avec plusieurs virus, notamment la grippe et les myxovirus. Les cellules ME-180 ont démontré leur capacité à développer des infections persistantes avec certains myxovirus, ce qui en fait un modèle utile pour étudier la latence virale et les effets à long terme d’une infection virale sur les cellules cancéreuses. La combinaison de son origine cancéreuse, de sa sensibilité aux virus et de ses caractéristiques de croissance spécifiques fait de la ME-180 un outil polyvalent tant en recherche oncologique qu’en virologie.
- Tissue
- Utérus, col de l'utérus
- Disease
- Carcinome épidermoïde
- Metastatic site
- Épiploon
- Synonyms
- Me-180
- ME 180
- ME180
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- De type épithélial
- Cell type
- Épithélial
04Identifiers
- Citation
- ME-180 (numéro de catalogue Cytion 300196)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1401
05Expression and susceptibility
- Viruses
- Positif au VPH68
06Handling and culture
- Culture medium
- McCoys 5a, w : 3,0 g/L de glucose, w : stable; glutamine, w : 2,0 mM de pyruvate de sodium, w : 2,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820200a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Seeding density
- 1 × 10⁴ cellules/cm²
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Post-thaw recovery
- Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- 66 ans
- Ethnicity
- caucasien
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes