Gå direkte til indholdet
ME-180-celler
Væv
Livmoder, livmoderhals
Sygdom
Epidermoid karcinom
Metastasested
Omentum
Synonymer
Me-180, ME 180, ME180

Dokumenter

ME-180-celler

Cell line · Varenummer 300196

ME-180-cellelinjen er en epitelcellelinje, der er etableret ud fra et stærkt invasivt pladecellekarcinom, som oprindeligt blev isoleret fra en metastase i omentum...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

ME-180-cellelinjen er en epitelcellelinje, der er etableret fra et meget invasivt pladecellekarcinom, som oprindeligt blev isoleret fra en omental metastase af et livmoderhalskræftkarcinom hos en 66-årig hvid kvindelig patient. Karcinomet var kendetegnet ved uregelmæssige celleklynger uden nævneværdig keratinisering og minimal nekrose. Denne cellelinje er særlig vigtig for kræftforskning, især i studier, der involverer livmoderhalskræft og andre former for pladecellekarcinom, på grund af dens oprindelse og aggressive natur. ME-180-celler er tumorigeniske og har vist sig at danne veldifferentierede epidermoide karcinomer, når de implanteres i nøgne mus.

ME-180-celler har flere unikke egenskaber, herunder en heteroploid karyotype med en subtriploid tilstand, hvilket indikerer et ustabilt kromosomalt arrangement. Cellerne udviser typisk epitelmorfologi med talrige desmosomer og tonofibriller, og de udviser ikke kontakthæmning, hvilket ofte fører til lagdelt vækst i kultur. Cellelinjens vækst hæmmes af tumornekrosefaktor alfa (TNF alfa), hvilket gør den nyttig til studier, der undersøger virkningerne af inflammatoriske cytokiner på tumorceller. Derudover indeholder ME-180-celler humant papillomavirus (HPV) DNA med en højere homologi til HPV-68 sammenlignet med HPV-18, hvilket kan være relevant for undersøgelser af HPV-relateret carcinogenese.

ME-180-celler er også værdifulde i forskning i infektionssygdomme på grund af deres følsomhed over for forskellige vira. Cellelinjen er blevet brugt til at studere interaktionen med flere vira, herunder influenza- og myxovirus. ME-180-celler har vist sig at være i stand til at danne vedvarende infektioner med nogle myxovirus, hvilket gør dem til en nyttig model til undersøgelse af viral latens og de langsigtede virkninger af virusinfektion på kræftceller. Kombinationen af dens kræftoprindelse, virale modtagelighed og specifikke vækstegenskaber gør ME-180 til et alsidigt værktøj i både onkologisk og virologisk forskning.

Væv
Livmoder, livmoderhals
Sygdom
Epidermoid karcinom
Metastasested
Omentum
Synonymer
  • Me-180
  • ME 180
  • ME180

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
ME-180 (Cytion katalognummer 300196)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1401

05Udtryk og modtagelighed

Vira
HPV68-positiv

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glukose, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820200a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
66 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk