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Células ME-180
Tissue
Útero, colo do útero
Disease
Carcinoma epidermoide
Metastatic site
Omento
Synonyms
Me-180, ME 180, ME180

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Células ME-180

Cell line · Product number 300196

The ME-180 cell line is an epithelial cell line established from a highly invasive squamous cell carcinoma, originally isolated from the omental metastasi...

US$395.00excl. tax and shipping
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01General information

Description

A linhagem celular ME-180 é uma linhagem de células epiteliais estabelecida a partir de um carcinoma espinocelular altamente invasivo, originalmente isolado da metástase omental de um carcinoma cervical em uma paciente branca de 66 anos. O carcinoma era caracterizado por aglomerados celulares irregulares, sem queratinização significativa e com necrose mínima. Essa linha celular é particularmente importante para a pesquisa sobre o câncer, especialmente em estudos envolvendo câncer cervical e outras formas de carcinoma de células escamosas, devido à sua origem e natureza agressiva. As células ME-180 são tumorigênicas e demonstraram formar carcinomas epidermoides bem diferenciados quando implantadas em camundongos nude.

As células ME-180 apresentam várias propriedades únicas, incluindo um cariótipo heteroplóide com um modo subtriplóide, indicando um arranjo cromossômico instável. As células exibem morfologia epitelial típica, com numerosos desmossomos e tonofibrilas, e não apresentam inibição de contato, o que frequentemente leva ao crescimento em camadas em cultura. O crescimento da linhagem celular é inibido pelo fator de necrose tumoral alfa (TNF-alfa), tornando-a útil para estudos que investigam os efeitos das citocinas inflamatórias nas células tumorais. Além disso, as células ME-180 contêm DNA do papilomavírus humano (HPV), com maior homologia ao HPV-68 em comparação com o HPV-18, o que pode ser relevante para estudos sobre a carcinogênese relacionada ao HPV.

As células ME-180 também são valiosas na pesquisa de doenças infecciosas devido à sua sensibilidade a vários vírus. A linhagem celular tem sido utilizada para estudar a interação com diversos vírus, incluindo o vírus da gripe e os mixovírus. As células ME-180 demonstraram a capacidade de formar infecções persistentes com alguns mixovírus, tornando-as um modelo útil para o estudo da latência viral e dos efeitos de longo prazo da infecção viral em células cancerosas. A combinação de sua origem cancerosa, suscetibilidade viral e características específicas de crescimento torna a ME-180 uma ferramenta versátil tanto na pesquisa oncológica quanto na virológica.

Tissue
Útero, colo do útero
Disease
Carcinoma epidermoide
Metastatic site
Omento
Synonyms
  • Me-180
  • ME 180
  • ME180

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Cell type
Epithelial

04Identifiers

Citation
ME-180 (número de catálogo da Cytion 300196)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1401

05Expression and susceptibility

Viruses
Positivo para o HPV68

06Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, p: 3,0 g/L de glicose, p: glutamina estável, p: 2,0 mM de piruvato de sódio, p: 2,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Seeding density
1 x 104 células/cm²
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Post-thaw recovery
Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
66 anos
Ethnicity
caucasiano