Gå direkt till innehållet
ME-180-celler
Vävnad
Livmoder, livmoderhals
Sjukdom
Epidermoid carcinom
Metastaseringsställe
Omentum
Synonymer
Me-180, ME 180, ME180

ME-180-celler

Cell line · Produktnummer 300196

Cellinjen ME-180 är en epitelcellinje som har etablerats från ett mycket invasivt skivepitelcancer, ursprungligen isolerad från en metastatisk bildning i omentum...

€430.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

ME-180-cellinjen är en epitelcellinje som etablerats från en mycket invasiv skivepitelcancer, ursprungligen isolerad från metastaser i omentalområdet från en livmoderhalscancer hos en 66-årig vit kvinna. Carcinomet kännetecknades av oregelbundna cellkluster utan signifikant keratinisering och med minimal nekros. På grund av sitt ursprung och sin aggressiva karaktär är denna cellinje särskilt viktig för cancerforskningen, i synnerhet i studier som omfattar livmoderhalscancer och andra former av skivepitelcancer. ME-180-celler är tumörframkallande och har visat sig bilda väldifferentierade epidermoida karcinom när de implanterats i nakna möss.

ME-180-cellerna har flera unika egenskaper, bland annat en heteroploid karyotyp med ett subtriploid läge, vilket tyder på ett instabilt kromosomarrangemang. Cellerna uppvisar en typisk epitelmorfologi med många desmosomer och tonofibriller, och de uppvisar inte kontaktinhibering, vilket ofta leder till skiktad tillväxt i odling. Cellinjens tillväxt hämmas av tumörnekrosfaktor alfa (TNF alfa), vilket gör den användbar för studier som undersöker effekterna av inflammatoriska cytokiner på tumörceller. ME-180-cellerna innehåller dessutom DNA från humant papillomvirus (HPV), med en högre homologi till HPV-68 jämfört med HPV-18, vilket kan vara relevant för studier av HPV-relaterad carcinogenes.

ME-180-cellerna är också värdefulla inom forskning om infektionssjukdomar på grund av sin känslighet för olika virus. Cellinjen har använts för att studera interaktionen med flera virus, bland annat influensa- och myxovirus. ME-180-celler har visat förmåga att bilda långvariga infektioner med vissa myxovirus, vilket gör dem till en användbar modell för att studera viruslatens och de långsiktiga effekterna av virusinfektion på cancerceller. Kombinationen av det cancerösa ursprunget, mottagligheten för virus och de specifika tillväxtegenskaperna gör ME-180 till ett mångsidigt verktyg inom både onkologisk och virologisk forskning.

Vävnad
Livmoder, livmoderhals
Sjukdom
Epidermoid carcinom
Metastaseringsställe
Omentum
Synonymer
  • Me-180
  • ME 180
  • ME180

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Celltyp
Epitelial

04Identifierare

Källa
ME-180 (Cytion katalognummer 300196)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1401

05Uttryck och mottaglighet

Virus
HPV68-positiv

06Hantering och odling

Odlingsmedium
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glukos, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820200a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Efter upptining, plattlägg cellerna med 5 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 24 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
66 år
Etnicitet
Kaukasisk