Zum Inhalt springen
ME-180-Zellen
Gewebe
Gebärmutter, Gebärmutterhals
Krankheit
Epidermoid-Karzinom
Metastasenherd
Omentum
Synonyme
Me-180, ME 180, ME180

Dokumente

ME-180-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300196

Die Zelllinie ME-180 ist eine Epithelzelllinie, die aus einem hochinvasiven Plattenepithelkarzinom gewonnen wurde, das ursprünglich aus einer Metastase im Omentum isoliert wurde...

€430.00zzgl. MwSt. und Versandkosten
Auf Lager
Charge
Empfohlen (frischeste Charge)
  • CoA
  • CoA
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie ME-180 ist eine Epithelzelllinie, die aus einem hochinvasiven Plattenepithelkarzinom gewonnen wurde, das ursprünglich aus der omentalen Metastase eines Zervixkarzinoms einer 66-jährigen weißen Patientin isoliert wurde. Das Karzinom war durch unregelmäßige Zellhaufen ohne nennenswerte Verhornung und minimale Nekrose gekennzeichnet. Diese Zelllinie ist aufgrund ihres Ursprungs und ihrer Aggressivität von besonderer Bedeutung für die Krebsforschung, insbesondere für Studien mit Gebärmutterhalskrebs und anderen Formen von Plattenepithelkarzinomen. ME-180-Zellen sind tumorerzeugend und bilden nachweislich gut differenzierte Epidermoidkarzinome, wenn sie in Nacktmäuse implantiert werden.

ME-180-Zellen haben mehrere einzigartige Eigenschaften, darunter einen heteroploiden Karyotyp mit einem subtriploiden Modus, was auf eine instabile Chromosomenanordnung hinweist. Die Zellen weisen eine typische epitheliale Morphologie mit zahlreichen Desmosomen und Tonofibrillen auf, und sie zeigen keine Kontakthemmung, was häufig zu einem geschichteten Wachstum in der Kultur führt. Das Wachstum der Zelllinie wird durch den Tumor-Nekrose-Faktor alpha (TNF alpha) gehemmt, was sie für Studien zur Untersuchung der Auswirkungen von Entzündungszytokinen auf Tumorzellen nützlich macht. Darüber hinaus enthalten ME-180-Zellen DNA des humanen Papillomavirus (HPV) mit einer höheren Homologie zu HPV-68 als zu HPV-18, was für Studien zur HPV-bedingten Karzinogenese von Bedeutung sein könnte.

ME-180-Zellen sind aufgrund ihrer Empfindlichkeit gegenüber verschiedenen Viren auch für die Erforschung von Infektionskrankheiten wertvoll. Die Zelllinie wurde zur Untersuchung der Interaktion mit verschiedenen Viren, darunter Influenza- und Myxoviren, verwendet. ME-180-Zellen haben gezeigt, dass sie in der Lage sind, persistente Infektionen mit einigen Myxoviren zu bilden, was sie zu einem nützlichen Modell für die Untersuchung der viralen Latenz und der langfristigen Auswirkungen einer Virusinfektion auf Krebszellen macht. Die Kombination aus krebsartigem Ursprung, viraler Anfälligkeit und spezifischen Wachstumseigenschaften macht ME-180 zu einem vielseitigen Werkzeug sowohl in der Onkologie als auch in der virologischen Forschung.

Gewebe
Gebärmutter, Gebärmutterhals
Krankheit
Epidermoid-Karzinom
Metastasenherd
Omentum
Synonyme
  • Me-180
  • ME 180
  • ME180

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
ME-180 (Cytion Katalognummer 300196)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1401

05Expression und Anfälligkeit

Viren
HPV68 positiv

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glucose, w: stabiles Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820200a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
66 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch