Премини към съдържанието
Клетки ME-180
Тъкан
Матка, шийка на матката
Заболяване
Епидермоиден карцином
Място на метастазите
Оментум
Синоними
Me-180, ME 180, ME180

Документи

Клетки ME-180

Cell line · Номер на продукта 300196

Клетъчната линия ME-180 е епителна клетъчна линия, получена от силно инвазивен плоскоклетъчен карцином, първоначално изолиран от метастази в омента...

€430.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия ME-180 е епителна клетъчна линия, създадена от силно инвазивен плоскоклетъчен карцином, първоначално изолиран от оментална метастаза на цервикален карцином при 66-годишна пациентка от бялата раса. Карциномът се характеризира с неправилни клетъчни струпвания без значителна кератинизация и минимална некроза. Тази клетъчна линия е от особено значение за изследванията на рака, особено при проучвания, включващи рак на маточната шийка и други форми на плоскоклетъчен карцином, поради своя произход и агресивен характер. Клетките ME-180 са туморогенни и е доказано, че образуват добре диференцирани епидермоидни карциноми при имплантиране в голи мишки.

Клетките ME-180 имат няколко уникални свойства, включително хетероплоиден кариотип със субтриплоиден режим, което показва нестабилно хромозомно разположение. Клетките показват типична епителна морфология с многобройни дезмозоми и тонофибрили и не проявяват контактна инхибиция, което често води до слоест растеж в култура. Растежът на клетъчната линия се инхибира от тумор некротизиращ фактор алфа (TNF алфа), което я прави полезна за проучвания, изследващи ефектите на възпалителните цитокини върху туморните клетки. Освен това клетките на ME-180 съдържат ДНК на човешки папиломен вирус (HPV), с по-висока хомология с HPV-68 в сравнение с HPV-18, което може да бъде от значение за проучвания на канцерогенезата, свързана с HPV.

Клетките ME-180 са ценни и при изследванията на инфекциозните заболявания поради чувствителността им към различни вируси. Клетъчната линия е използвана за изследване на взаимодействието с няколко вируса, включително грипни и миксовируси. Клетките ME-180 са показали способност да образуват устойчиви инфекции с някои миксовируси, което ги прави полезен модел за изучаване на вирусната латентност и дългосрочните ефекти на вирусната инфекция върху раковите клетки. Комбинацията от раковия произход, вирусната чувствителност и специфичните характеристики на растеж правят ME-180 универсален инструмент както в онкологичните, така и във вирусологичните изследвания.

Тъкан
Матка, шийка на матката
Заболяване
Епидермоиден карцином
Място на метастазите
Оментум
Синоними
  • Me-180
  • ME 180
  • ME180

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
2

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителиален

04Идентификатори

Източник
ME-180 (каталожен номер 300196 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1401

05Проява и предразположеност

Вируси
HPV68 положителен

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
McCoys 5a, w: 3,0 g/L глюкоза, w: стабилен глутамин, w: 2,0 mM натриев пируват, w: 2,2 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820200a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
66 години
Етническа принадлежност
Кавказки