Tartalomra ugrás
ME-180 sejtek
Szövet
Méh, méhnyak
Betegség
Epidermoid karcinóma
Áttétes hely
Omentum
Szinonimák
Me-180, ME 180, ME180

Dokumentumok

ME-180 sejtek

Cell line · Termékszám 300196

Az ME-180 sejtvonal egy erősen invazív laphámsejtes karcinómából létrehozott hámsejtvonal, amelyet eredetileg a omentális áttétből izoláltak...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az ME-180 sejtvonal egy olyan epiteliális sejtvonal, amelyet egy 66 éves fehér bőrű nőbeteg méhnyakrákjának omentális metasztázisából izolált, erősen invazív laphámsejtes karcinómából hoztak létre. A karcinómát szabálytalan sejtcsomók jellemezték, jelentős keratinizáció és minimális nekrózis nélkül. Ez a sejtvonal különösen jelentős a rákkutatás szempontjából, különösen a méhnyakrák és a laphámrák más formáival kapcsolatos vizsgálatokban, származása és agresszív jellege miatt. Az ME-180 sejtek tumorigénak bizonyultak, és meztelen egerekbe ültetve jól differenciált epidermoid karcinómákat képeznek.

Az ME-180 sejtek számos egyedi tulajdonsággal rendelkeznek, többek között heteroploid kariotípussal, szubtriploid móddal, ami instabil kromoszómaelrendezésre utal. A sejtek tipikus epiteliális morfológiát mutatnak, számos deszmoszómával és tonofibrillummal, és nem mutatnak kontaktgátlást, ami gyakran réteges növekedést eredményez a kultúrában. A sejtvonal növekedését gátolja a tumor nekrózis faktor alfa (TNF alfa), így hasznos a gyulladásos citokinek tumorsejtekre gyakorolt hatását vizsgáló vizsgálatokban. Emellett az ME-180 sejtek humán papillomavírus (HPV) DNS-t tartalmaznak, amely a HPV-18-hoz képest nagyobb homológiát mutat a HPV-68-cal, ami fontos lehet a HPV-vel kapcsolatos karcinogenezissel kapcsolatos vizsgálatok szempontjából.

A ME-180 sejtek a fertőző betegségek kutatásában is értékesek a különböző vírusokkal szembeni érzékenységük miatt. A sejtvonalat több vírussal, köztük influenza- és myxovírusokkal való kölcsönhatás tanulmányozására használták. A ME-180 sejtek bizonyították, hogy képesek tartós fertőzést kialakítani néhány myxovírussal, így hasznos modellnek bizonyultak a víruslátencia és a vírusfertőzés rákos sejtekre gyakorolt hosszú távú hatásainak tanulmányozására. A rákos eredet, a vírusérzékenység és a specifikus növekedési jellemzők kombinációja a ME-180 sejtet sokoldalú eszközzé teszi mind az onkológiai, mind a virológiai kutatásban.

Szövet
Méh, méhnyak
Betegség
Epidermoid karcinóma
Áttétes hely
Omentum
Szinonimák
  • Me-180
  • ME 180
  • ME180

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Epithelialis

04Azonosítók

Hivatkozás
ME-180 (Cytion katalógusszám: 300196)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1401

05Kifejeződés és fogékonyság

Vírusok
HPV68 pozitív

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
McCoys 5a, w: 3,0 g/L glükóz, w: stabil glutamin, w: 2,0 mM nátrium-piruvát, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám: 820200a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
66 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi