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Células ME-180
Pañuelo de papel
Útero, cuello uterino
Enfermedad
Carcinoma epidermoide
Lugar de metástasis
Omento
Sinónimos
Me-180, ME 180, ME180

Documentos

Células ME-180

Cell line · Número de producto 300196

La línea celular ME-180 es una línea celular epitelial obtenida a partir de un carcinoma de células escamosas altamente invasivo, aislado originalmente de una metástasis omental...

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01Información general

Descripción

La línea celular ME-180 es una línea celular epitelial establecida a partir de un carcinoma de células escamosas altamente invasivo, aislado originalmente de la metástasis omental de un carcinoma cervical en una paciente blanca de 66 años. El carcinoma se caracterizaba por agrupaciones celulares irregulares sin queratinización significativa y necrosis mínima. Esta línea celular es especialmente significativa para la investigación del cáncer, sobre todo en estudios relacionados con el cáncer de cuello de útero y otras formas de carcinoma de células escamosas, debido a su origen y naturaleza agresiva. Las células ME-180 son tumorigénicas y se ha demostrado que forman carcinomas epidermoides bien diferenciados cuando se implantan en ratones desnudos.

Las células ME-180 tienen varias propiedades únicas, como un cariotipo heteroploide con un modo subtriploide, lo que indica una disposición cromosómica inestable. Las células presentan una morfología epitelial típica con numerosos desmosomas y tonofibrillas, y no muestran inhibición por contacto, lo que a menudo conduce a un crecimiento en capas en cultivo. El crecimiento de la línea celular se ve inhibido por el factor de necrosis tumoral alfa (TNF alfa), lo que la hace útil para estudios que investigan los efectos de las citocinas inflamatorias en las células tumorales. Además, las células ME-180 contienen ADN del virus del papiloma humano (VPH), con una mayor homología con el VPH-68 que con el VPH-18, lo que podría ser relevante para estudios sobre la carcinogénesis relacionada con el VPH.

Las células ME-180 también son valiosas en la investigación de enfermedades infecciosas debido a su sensibilidad a diversos virus. La línea celular se ha utilizado para estudiar la interacción con varios virus, incluidos los de la gripe y los mixovirus. Las células ME-180 han demostrado la capacidad de formar infecciones persistentes con algunos mixovirus, lo que las convierte en un modelo útil para estudiar la latencia vírica y los efectos a largo plazo de la infección vírica en las células cancerosas. La combinación de su origen canceroso, su susceptibilidad viral y sus características específicas de crecimiento hacen de ME-180 una herramienta versátil tanto en la investigación oncológica como en la virológica.

Pañuelo de papel
Útero, cuello uterino
Enfermedad
Carcinoma epidermoide
Lugar de metástasis
Omento
Sinónimos
  • Me-180
  • ME 180
  • ME180

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
2

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tipo de célula
Epitelial

04Identificadores

Referencia
ME-180 (número de catálogo 300196 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1401

05Expresión y susceptibilidad

Virus
VPH68 positivo

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glucosa, w: Glutamina estable, w: 2,0 mM Piruvato sódico, w: 2,2 g/L NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820200a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
66 años
Origen étnico
Caucásico