Skip to content
เซลล์ ME-180
Tissue
มดลูก, ปากมดลูก
Disease
มะเร็งผิวหนังชนิดเอพิเดอร์โมอิด
Metastatic site
เยื่อไขมันในช่องท้อง
Synonyms
Me-180, ME 180, ME180

Documents

เซลล์ ME-180

Cell line · Product number 300196

The ME-180 cell line is an epithelial cell line established from a highly invasive squamous cell carcinoma, originally isolated from the omental metastasi...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ ME-180 เป็นสายเซลล์เยื่อบุผิวที่สร้างขึ้นจากมะเร็งเซลล์สความัสที่มีความรุกรานสูง ซึ่งแยกได้จากมะเร็งปากมดลูกที่แพร่กระจายไปยังเยื่อไขมันในช่องท้องของผู้ป่วยหญิงผิวขาวอายุ 66 ปีมะเร็งชนิดนี้ถูกจำแนกโดยกลุ่มเซลล์ที่ไม่สม่ำเสมอไม่มีการสร้างเคอราไทไนเซชันอย่างมีนัยสำคัญและมีเนื้อเยื่อตายเพียงเล็กน้อย สายเซลล์นี้มีความสำคัญอย่างยิ่งสำหรับการวิจัยมะเร็ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งปากมดลูกและมะเร็งชนิดสแควมัสเซลล์คาร์ซิโนมาชนิดอื่น ๆ เนื่องจากต้นกำเนิดและลักษณะที่ก้าวร้าวของมัน เซลล์ ME-180 สามารถก่อให้เกิดเนื้องอกและแสดงให้เห็นว่าสามารถก่อให้เกิดมะเร็งชนิดเอพิเดอร์โมอิดคาร์ซิโนมาที่มีการแยกตัวดีเมื่อปลูกถ่ายในหนูที่ไม่มีภูมิคุ้มกัน

เซลล์ ME-180 มีคุณสมบัติเฉพาะหลายประการ รวมถึงการมีโครโมโซมแบบเฮเทอโรพลอยด์ที่มีโหมดซับไตรพลอยด์ ซึ่งบ่งชี้ถึงการจัดเรียงโครโมโซมที่ไม่เสถียร เซลล์เหล่านี้แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์เยื่อบุผิวทั่วไป มีเดสโมโซมและโทโนไฟบริลจำนวนมาก และไม่แสดงการยับยั้งการเจริญเติบโตเมื่อสัมผัสกัน มักนำไปสู่การเจริญเติบโตเป็นชั้นในวัฒนธรรมการเจริญเติบโตของเซลล์ไลน์ถูกยับยั้งโดยตัวทำลายเนื้องอกอัลฟา (TNF alpha) ซึ่งทำให้มีประโยชน์ในการศึกษาผลกระทบของไซโตไคน์อักเสบต่อเซลล์เนื้องอก นอกจากนี้ เซลล์ ME-180 ยังมีดีเอ็นเอของไวรัสฮิวแมนแพปิลโลมา (HPV) ซึ่งมีความคล้ายคลึงกับ HPV-68 มากกว่า HPV-18 ซึ่งอาจมีความเกี่ยวข้องกับการศึกษาการเกิดมะเร็งที่เกี่ยวข้องกับ HPV

เซลล์ ME-180 ยังมีคุณค่าในการวิจัยโรคติดเชื้อเนื่องจากมีความไวต่อไวรัสหลากหลายชนิด สายพันธุ์เซลล์นี้ถูกนำมาใช้ในการศึกษาปฏิสัมพันธ์กับไวรัสหลายชนิด รวมถึงไข้หวัดใหญ่และมิกโซไวรัสเซลล์ ME-180 แสดงความสามารถในการก่อให้เกิดการติดเชื้อที่คงอยู่ได้กับเชื้อไวรัสกลุ่มมิคโซไวรัสบางชนิด ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นแบบจำลองที่มีประโยชน์สำหรับการศึกษาภาวะไวรัสแฝงและผลกระทบระยะยาวของการติดเชื้อไวรัสต่อเซลล์มะเร็ง การผสมผสานระหว่างต้นกำเนิดที่เป็นมะเร็ง ความไวต่อไวรัส และลักษณะการเจริญเติบโตเฉพาะ ทำให้ ME-180 เป็นเครื่องมืออเนกประสงค์ทั้งในการวิจัยด้านมะเร็งวิทยาและไวรัสวิทยา

Tissue
มดลูก, ปากมดลูก
Disease
มะเร็งผิวหนังชนิดเอพิเดอร์โมอิด
Metastatic site
เยื่อไขมันในช่องท้อง
Synonyms
  • Me-180
  • ME 180
  • ME180

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
ME-180 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300196)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1401

05Expression and susceptibility

Viruses
HPV68 เป็นบวก

06Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, w: 3.0 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: เสถียร กลูตามีน, w: 2.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 2.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
66 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน