Gå til innholdet
ME-180-celler
Vev
Livmor, livmorhals
Sykdom
Epidermoid karsinom
Metastaseområde
Omentum
Synonymer
Me-180, ME 180, ME180

Dokumenter

ME-180-celler

Cell line · Produktnummer 300196

ME-180-cellelinjen er en epitelcellelinje som er etablert fra et svært invasivt plateepitelkarsinom, opprinnelig isolert fra en metastase i omentum...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

ME-180-cellelinjen er en epitelcellelinje som er etablert fra et svært invasivt plateepitelkarsinom, opprinnelig isolert fra en omental metastase av et livmorhalskreft hos en 66 år gammel hvit kvinne. Karsinomet var karakterisert av uregelmessige celleansamlinger uten nevneverdig keratinisering og med minimal nekrose. Denne cellelinjen er spesielt viktig for kreftforskning, særlig i studier som involverer livmorhalskreft og andre former for plateepitelkarsinom, på grunn av sin opprinnelse og aggressive natur. ME-180-celler er tumorigeniske og har vist seg å danne veldifferensierte epidermoide karsinomer når de implanteres i nakne mus.

ME-180-celler har flere unike egenskaper, blant annet en heteroploid karyotype med en subtriploid modus, noe som indikerer et ustabilt kromosomalt arrangement. Cellene har en typisk epitelmorfologi med mange desmosomer og tonofibriller, og de viser ikke kontaktinhibering, noe som ofte fører til lagvis vekst i kultur. Cellelinjens vekst hemmes av tumornekrosefaktor alfa (TNF alfa), noe som gjør den nyttig for studier som undersøker effekten av inflammatoriske cytokiner på tumorceller. I tillegg inneholder ME-180-celler DNA fra humant papillomavirus (HPV), med høyere homologi til HPV-68 enn til HPV-18, noe som kan være relevant for studier av HPV-relatert karsinogenese.

ME-180-celler er også verdifulle i forskning på infeksjonssykdommer på grunn av deres følsomhet for ulike virus. Cellelinjen har blitt brukt til å studere interaksjonen med flere virus, blant annet influensavirus og myxovirus. ME-180-celler har vist evne til å danne vedvarende infeksjoner med enkelte myxovirus, noe som gjør dem til en nyttig modell for å studere viruslatens og langtidseffekter av virusinfeksjon på kreftceller. Kombinasjonen av kreftopprinnelse, mottakelighet for virus og spesifikke vekstegenskaper gjør ME-180 til et allsidig verktøy innen både onkologisk og virologisk forskning.

Vev
Livmor, livmorhals
Sykdom
Epidermoid karsinom
Metastaseområde
Omentum
Synonymer
  • Me-180
  • ME 180
  • ME180

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
ME-180 (Cytion katalognummer 300196)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1401

05Uttrykk og mottakelighet

Virus
HPV68-positiv

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
McCoys 5a, m: 3,0 g/L glukose, m: stabil glutamin, m: 2,0 mM natriumpyruvat, m: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820200a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
66 år
Etnisitet
Kaukasisk