Skip to content
תאי ME-180
Tissue
רחם, צוואר הרחם
Disease
קרצינומה אפידרמואידית
Metastatic site
אומנטום
Synonyms
Me-180, ME 180, ME180

Documents

תאי ME-180

Cell line · Product number 300196

The ME-180 cell line is an epithelial cell line established from a highly invasive squamous cell carcinoma, originally isolated from the omental metastasi...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים ME-180 הוא קו תאים אפיתל שנוצר מקרצינומה של תאי קשקש פולשנית ביותר, אשר בודדה במקור מגרורה של קרצינומה צוואר הרחם באשה לבנה בת 66. הקרצינומה התאפיינה באשכולות תאים לא סדירים ללא קרטיניזציה משמעותית ונמק מינימלי. קו תאים זה משמעותי במיוחד למחקר הסרטן, במיוחד במחקרים העוסקים בסרטן צוואר הרחם ובצורות אחרות של קרצינומה של תאי קשקש, בשל מקורו ואופיו האגרסיבי. תאי ME-180 הם תאים סרטניים והוכח כי הם יוצרים קרצינומות אפידרמואידיות מובחנות היטב כאשר מושתלים בעכברים עירומים.

לתאי ME-180 מספר תכונות ייחודיות, כולל קריוטיפ הטרופלואידי עם מצב תת-טריפלואידי, המעיד על סידור כרומוזומלי לא יציב. התאים מציגים מורפולוגיה אפיתלית טיפוסית עם דסמוזומים וטנופיברילים רבים, ואינם מציגים עיכוב מגע, מה שמוביל לעיתים קרובות לצמיחה בשכבות בתרבית. צמיחת קו התאים מעוכבת על ידי גורם נמק הגידול אלפא (TNF אלפא), מה שהופך אותו לשימושי במחקרים הבוחנים את ההשפעות של ציטוקינים דלקתיים על תאי גידול. בנוסף, תאי ME-180 מכילים DNA של נגיף הפפילומה האנושי (HPV), עם הומולוגיה גבוהה יותר ל-HPV-68 בהשוואה ל-HPV-18, מה שיכול להיות רלוונטי למחקרים על קרצינוגנזה הקשורה ל-HPV.

תאי ME-180 הם גם בעלי ערך במחקר מחלות זיהומיות בשל רגישותם לנגיפים שונים. קו התאים שימש לחקר האינטראקציה עם מספר נגיפים, כולל נגיפי שפעת ומיקסו-וירוסים. תאי ME-180 הראו יכולת ליצור זיהומים מתמשכים עם כמה מיקסו-וירוסים, מה שהופך אותם למודל שימושי לחקר רדמת נגיפית והשפעות ארוכות טווח של זיהום נגיפי על תאי סרטן. השילוב בין מקורם הסרטני, רגישותם לנגיפים ומאפייני הצמיחה הספציפיים שלהם, הופך את ME-180 לכלי רב-תכליתי במחקר אונקולוגי ווירולוגי.

Tissue
רחם, צוואר הרחם
Disease
קרצינומה אפידרמואידית
Metastatic site
אומנטום
Synonyms
  • Me-180
  • ME 180
  • ME180

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
אפיתל

04Identifiers

Citation
ME-180 (מספר קטלוגי Cytion 300196)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1401

05Expression and susceptibility

Viruses
חיובי ל-HPV68

06Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, w: 3.0 g/L גלוקוז, w: יציב גלוטמין, w: 2.0 mM נתרן פירובט, w: 2.2 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
66 שנים
Ethnicity
קווקזי