
- Tissue
- רחם, צוואר הרחם
- Disease
- קרצינומה אפידרמואידית
- Metastatic site
- אומנטום
- Synonyms
- Me-180, ME 180, ME180
Documents
01General information
- Description
קו התאים ME-180 הוא קו תאים אפיתל שנוצר מקרצינומה של תאי קשקש פולשנית ביותר, אשר בודדה במקור מגרורה של קרצינומה צוואר הרחם באשה לבנה בת 66. הקרצינומה התאפיינה באשכולות תאים לא סדירים ללא קרטיניזציה משמעותית ונמק מינימלי. קו תאים זה משמעותי במיוחד למחקר הסרטן, במיוחד במחקרים העוסקים בסרטן צוואר הרחם ובצורות אחרות של קרצינומה של תאי קשקש, בשל מקורו ואופיו האגרסיבי. תאי ME-180 הם תאים סרטניים והוכח כי הם יוצרים קרצינומות אפידרמואידיות מובחנות היטב כאשר מושתלים בעכברים עירומים.
לתאי ME-180 מספר תכונות ייחודיות, כולל קריוטיפ הטרופלואידי עם מצב תת-טריפלואידי, המעיד על סידור כרומוזומלי לא יציב. התאים מציגים מורפולוגיה אפיתלית טיפוסית עם דסמוזומים וטנופיברילים רבים, ואינם מציגים עיכוב מגע, מה שמוביל לעיתים קרובות לצמיחה בשכבות בתרבית. צמיחת קו התאים מעוכבת על ידי גורם נמק הגידול אלפא (TNF אלפא), מה שהופך אותו לשימושי במחקרים הבוחנים את ההשפעות של ציטוקינים דלקתיים על תאי גידול. בנוסף, תאי ME-180 מכילים DNA של נגיף הפפילומה האנושי (HPV), עם הומולוגיה גבוהה יותר ל-HPV-68 בהשוואה ל-HPV-18, מה שיכול להיות רלוונטי למחקרים על קרצינוגנזה הקשורה ל-HPV.
תאי ME-180 הם גם בעלי ערך במחקר מחלות זיהומיות בשל רגישותם לנגיפים שונים. קו התאים שימש לחקר האינטראקציה עם מספר נגיפים, כולל נגיפי שפעת ומיקסו-וירוסים. תאי ME-180 הראו יכולת ליצור זיהומים מתמשכים עם כמה מיקסו-וירוסים, מה שהופך אותם למודל שימושי לחקר רדמת נגיפית והשפעות ארוכות טווח של זיהום נגיפי על תאי סרטן. השילוב בין מקורם הסרטני, רגישותם לנגיפים ומאפייני הצמיחה הספציפיים שלהם, הופך את ME-180 לכלי רב-תכליתי במחקר אונקולוגי ווירולוגי.
- Tissue
- רחם, צוואר הרחם
- Disease
- קרצינומה אפידרמואידית
- Metastatic site
- אומנטום
- Synonyms
- Me-180
- ME 180
- ME180
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Cell type
- אפיתל
04Identifiers
- Citation
- ME-180 (מספר קטלוגי Cytion 300196)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1401
05Expression and susceptibility
- Viruses
- חיובי ל-HPV68
06Handling and culture
- Culture medium
- McCoys 5a, w: 3.0 g/L גלוקוז, w: יציב גלוטמין, w: 2.0 mM נתרן פירובט, w: 2.2 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820200a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 66 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes