الانتقال إلى المحتوى
خلايا ME-180
الأنسجة
الرحم، عنق الرحم
المرض
السرطان البشراني
موقع الانتشار
الثرب
المرادفات
Me-180, ME 180, ME180

المستندات

خلايا ME-180

Cell line · رقم المنتج 300196

سلسلة الخلايا ME-180 هي سلسلة خلايا ظهارية تم إنشاؤها من سرطان خلايا حرشفية شديد الانتشار، تم عزلها في الأصل من ورم خبيث في الثرب...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

الخط الخلوي ME-180 هو خط خلوي طلائي تم إنشاؤه من سرطان الخلايا الحرشفية شديد التوغل، تم عزله في الأصل من ورم خبيث في الثرب لسرطان عنق الرحم لدى مريضة بيضاء تبلغ من العمر 66 عاماً. وتميز هذا السرطان بتجمعات خلوية غير منتظمة مع عدم وجود تقرن كبير ونخر ضئيل. هذا الخط الخلوي مهم بشكل خاص لأبحاث السرطان، خاصةً في الدراسات التي تشمل سرطان عنق الرحم وأشكال أخرى من سرطان الخلايا الحرشفية، وذلك بسبب أصله وطبيعته العدوانية. إن خلايا ME-180 مولدة للأورام وقد ثبت أنها تشكل أوراماً سرطانية بشرانية متمايزة بشكل جيد عند زرعها في فئران عارية.

وتتميز خلايا ME-180 بالعديد من الخصائص الفريدة، بما في ذلك النمط النووي غير المتغاير الصبغيات مع وضع شبه صبغي غير مستقر، مما يشير إلى ترتيب كروموسومي غير مستقر. تُظهر الخلايا مورفولوجيا طلائية نموذجية مع العديد من الديسموسومات واللييفات اللونية ولا تُظهر تثبيطاً للتلامس، مما يؤدي غالباً إلى نمو الطبقات في المزرعة. يتم تثبيط نمو خط الخلية بواسطة عامل نخر الورم ألفا (TNF alpha)، مما يجعله مفيداً للدراسات التي تبحث في آثار السيتوكينات الالتهابية على الخلايا السرطانية. وبالإضافة إلى ذلك، تحتوي خلايا ME-180 على الحمض النووي لفيروس الورم الحليمي البشري (HPV)، مع وجود تماثل أعلى مع فيروس الورم الحليمي البشري-68 مقارنةً بفيروس الورم الحليمي البشري-18، مما قد يكون ذا صلة بالدراسات المتعلقة بتكوين السرطان المرتبط بفيروس الورم الحليمي البشري.

تُعد خلايا ME-180 ذات قيمة أيضًا في أبحاث الأمراض المعدية نظرًا لحساسيتها لمختلف الفيروسات. وقد استُخدم خط الخلايا لدراسة التفاعل مع العديد من الفيروسات، بما في ذلك فيروسات الإنفلونزا والفيروسات المخاطية. وقد أظهرت خلايا ME-180 القدرة على تكوين عدوى مستمرة مع بعض الفيروسات المخاطية، مما يجعلها نموذجًا مفيدًا لدراسة الكمون الفيروسي والآثار طويلة الأمد للعدوى الفيروسية على الخلايا السرطانية. إن الجمع بين أصلها السرطاني وقابليتها الفيروسية وخصائص نموها المحددة تجعل من ME-180 أداة متعددة الاستخدامات في كل من أبحاث علم الأورام والفيروسات.

الأنسجة
الرحم، عنق الرحم
المرض
السرطان البشراني
موقع الانتشار
الثرب
المرادفات
  • Me-180
  • ME 180
  • ME180

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
2

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
نوع الخلية
الظهارة

04المعرّفات

المرجع
ME-180 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 300196)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1401

05التعبير والقابلية للإصابة

الفيروسات
فيروس الورم الحليمي البشري 68 إيجابي

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
مكويز 5 أ، ث: 3.0 جم/لتر جلوكوز، ث: جلوتامين مستقر، ث: 2.0 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820200 أ)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
66 سنة
الأصل العرقي
قوقازي