OP9

La línea celular OP9, una línea de células estromales derivada de la calota craneal de ratones op/op, presenta una mutación que provoca la ausencia del factor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF), una citocina fundamental que interviene en la diferenciación, la supervivencia y la función de diversos tipos de células, incluidos los macrófagos y los osteoclastos.

Las células OP9 se han utilizado ampliamente en el campo de la investigación sobre la hematopoyesis como capas alimentadoras en sistemas de cocultivo para apoyar la diferenciación y expansión tanto de las células madre hematopoyéticas (HSC) como de las células madre embrionarias (ESC). Estos sistemas de cocultivo han facilitado el estudio de las vías de diferenciación hematopoyética, permitiendo que las MSC se diferencien en células eritroides adultas, eritroblastos y glóbulos rojos, así como en osteocitos, condrocitos, miocitos, tenocitos y adipocitos. El papel de apoyo de las células OP9 en estos sistemas se atribuye a su capacidad para producir un microambiente propicio, rico en citocinas y factores de crecimiento esenciales para la proliferación de las células madre y la diferenciación específica de cada linaje.

Además, la línea celular OP9 es fundamental para estudiar la reacción leucocitaria y el desarrollo de células inmunitarias, como las células asesinas naturales (NK), lo que demuestra la utilidad de la línea de ratones OP9 en la investigación inmunológica. Los factores secretores producidos por las células OP9, incluidos factores de crecimiento como el bFGF, el IGF-1, la IL-3, el PDGF-BB, el TGF-β1 y el TGF-β3, desempeñan un papel fundamental en los procesos de migración y diferenciación celular.

Las células OP9 presentan un aspecto similar al de los fibroblastos, caracterizado por una morfología plana y en forma de huso. Este rasgo morfológico es típico de las células estromales mesenquimales, conocidas por sus funciones de apoyo en el microambiente de la médula ósea.

A pesar de su enorme potencial, las células OP9 tienen limitaciones debido a su naturaleza no inmortalizada, lo que restringe su uso a proyectos a corto plazo y a pequeña escala, lo que subraya la necesidad de una planificación y consideración cuidadosas en los diseños experimentales.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.