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OP9
Tissue
骨髓、基質
Synonyms
OP-9

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OP9

Cell line · Product number 305174

The OP9 cell line, a stromal cell line derived from the calvariae of op/op mice, has a mutation that leads to a lack of macrophage colony-stimulating fact...

US$395.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

OP9 細胞系是一種源自 op/op 小鼠顱骨的基質細胞系,其攜帶的突變導致缺乏巨噬細胞集落刺激因子 (M-CSF),而該因子是參與包括巨噬細胞和破骨細胞在內之各類細胞分化、存活及功能的重要細胞因子。

OP9 細胞在造血研究領域中被廣泛用作共培養系統中的餵養層,以支持造血幹細胞(HSCs)和胚胎幹細胞(ESCs)的分化與擴增。 這些共培養系統促進了造血分化途徑的研究,使間質幹細胞(MSCs)能夠分化為成體紅系細胞、紅細胞前體和紅血球,以及骨細胞、軟骨細胞、肌細胞、肌腱細胞和脂肪細胞。 OP9 細胞在這些系統中發揮支持作用,歸因於其能夠產生富含細胞因子和生長因子的有利微環境,這些因子對於幹細胞的增殖和譜系特異性分化至關重要。

此外,OP9 細胞系對於研究白細胞反應以及自然殺手(NK)細胞等免疫細胞的發育至關重要,這顯示了 OP9 小鼠品系在免疫學研究中的實用性。 OP9 細胞所分泌的因子,包括 bFGF、IGF-1、IL-3、PDGF-BB、TGF-β1 及 TGF-β3 等生長因子,在細胞遷移與分化過程中扮演關鍵角色。

OP9 細胞呈現類成纖維細胞的外觀,其特徵為紡錘狀且扁平的形態。此形態特徵是間質基質細胞的典型特徵,而間質基質細胞以其在骨髓微環境中的支持功能而聞名。

儘管潛力巨大,但由於 OP9 細胞具有非永生化特性,其應用範圍僅限於短期及小規模研究,這凸顯了在實驗設計時需進行周詳規劃與審慎考量。

Tissue
骨髓、基質
Synonyms
  • OP-9

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
成纖維細胞樣

04Identifiers

Citation
OP9(Cytion 型號 305174)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_4398

05Handling and culture

Culture medium
Alpha MEM,含:2.0 mM 穩定谷氨醯胺,不含:核苷,不含:脫氧核苷,含:1.0 mM 丙酮酸鈉,含:2.2 g/L NaHCO₃
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 20% 的胎牛血清 (FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

07Donor

Breed / subspecies
(C57BL/6 × C3H) F2-op/op
Donor age
胚胎