OP9

Linia komórkowa OP9, linia komórek zrębu pochodząca z kalwarii myszy op/op, ma mutację, która prowadzi do braku czynnika stymulującego kolonie makrofagów (M-CSF), który jest krytyczną cytokiną zaangażowaną w różnicowanie, przeżycie i funkcję różnych typów komórek, w tym makrofagów i osteoklastów.

Komórki OP9 były szeroko stosowane w dziedzinie badań nad hematopoezą jako warstwy zasilające w systemach ko-kultury w celu wspierania różnicowania i ekspansji zarówno hematopoetycznych komórek macierzystych (HSC), jak i embrionalnych komórek macierzystych (ESC). Systemy te ułatwiły badanie szlaków różnicowania hematopoetycznego, umożliwiając MSC różnicowanie się w dorosłe komórki erytroidalne, erytroblasty i czerwone krwinki oraz osteocyty, chondrocyty, miocyty, tenocyty i adipocyty. Wspomagająca rola komórek OP9 w tych systemach jest przypisywana ich zdolności do wytwarzania sprzyjającego mikrośrodowiska bogatego w cytokiny i czynniki wzrostu niezbędne do proliferacji komórek macierzystych i różnicowania specyficznego dla linii.

Co więcej, linia komórkowa OP9 odgrywa kluczową rolę w badaniu reakcji leukocytów i rozwoju komórek odpornościowych, takich jak komórki NK (natural killer), demonstrując użyteczność mysiej linii OP9 w badaniach immunologicznych. Czynniki wydzielnicze produkowane przez komórki OP9, w tym czynniki wzrostu, takie jak bFGF, IGF-1, IL-3, PDGF-BB, TGF-β1 i TGF-β3, odgrywają kluczową rolę w procesach migracji i różnicowania komórek.

Komórki OP9 wykazują wygląd podobny do fibroblastów, charakteryzujący się wrzecionowatą, płaską morfologią. Ta cecha morfologiczna jest typowa dla mezenchymalnych komórek zrębowych, które są znane ze swoich funkcji wspomagających w mikrośrodowisku szpiku kostnego.

Pomimo ogromnego potencjału, komórki OP9 mają ograniczenia wynikające z ich nieimmortalizowanego charakteru, co ogranicza ich wykorzystanie do krótkoterminowych projektów na małą skalę, podkreślając potrzebę starannego planowania i rozważenia w projektach eksperymentalnych.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym