Pereiti prie turinio
OP9
Audinys
Kaulų čiulpai, stromos
Sinonimai
OP-9

Dokumentai

OP9

Cell line · Prekės numeris 305174

The OP9 cell line, a stromal cell line derived from the calvariae of op/op mice, has a mutation that leads to a lack of macrophage colony-stimulating fact...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

OP9 ląstelių linija, stromos ląstelių linija, gauta iš op/op pelių kalvarijų, turi mutaciją, dėl kurios trūksta makrofagų kolonijas stimuliuojančio faktoriaus (M-CSF), kuris yra labai svarbus citokinas, dalyvaujantis įvairių tipų ląstelių, įskaitant makrofagus ir osteoklastus, diferenciacijoje, išlikime ir veikloje.

OP9 ląstelės plačiai naudojamos kraujodaros tyrimuose kaip maitinamieji sluoksniai bendrakultūrinėse sistemose kraujodaros kamieninėms ląstelėms ir embrioninėms kamieninėms ląstelėms diferencijuotis ir plėstis. Šios bendrakultūrinės sistemos palengvino kraujodaros diferenciacijos būdų tyrimus, suteikdamos galimybę MSC diferencijuotis į suaugusiųjų eritroidines ląsteles, eritroblastus ir eritrocitus bei osteocitus, chondrocitus, miocitus, tenocitus ir adipocitus. OP9 ląstelių pagalbinis vaidmuo šiose sistemose siejamas su jų gebėjimu sukurti palankią mikroaplinką, kurioje gausu citokinų ir augimo veiksnių, būtinų kamieninių ląstelių proliferacijai ir linijinei diferenciacijai.

Be to, OP9 ląstelių linija padeda tirti leukocitų reakciją ir imuninių ląstelių, pavyzdžiui, natūraliųjų žudikų (NK) ląstelių, vystymąsi, o tai rodo OP9 pelių linijos naudingumą imunologiniuose tyrimuose. OP9 ląstelių gaminami sekreciniai veiksniai, įskaitant tokius augimo veiksnius kaip bFGF, IGF-1, IL-3, PDGF-BB, TGF-β1 ir TGF-β3, atlieka lemiamą vaidmenį ląstelių migracijos ir diferenciacijos procesuose.

OP9 ląstelės yra panašios į fibroblastus, joms būdinga verpstės formos plokščia morfologija. Šis morfologinis bruožas būdingas mezenchiminėms stromos ląstelėms, kurios žinomos dėl savo palaikomųjų funkcijų kaulų čiulpų mikroaplinkoje.

Nepaisant didžiulio OP9 ląstelių potencialo, jos turi apribojimų dėl savo neimortalizuotos prigimties, todėl jas galima naudoti tik trumpalaikiams ir nedidelės apimties projektams, o tai rodo, kad reikia kruopščiai planuoti ir apsvarstyti eksperimentų planus.

Audinys
Kaulų čiulpai, stromos
Sinonimai
  • OP-9

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į fibroblastus panašus

04Identifikatoriai

Nuoroda
OP9 (Cytion katalogo numeris 305174)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_4398

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Alfa MEM, w: 2,0 mM stabilus glutaminas, w/o: Ribonukleozidai, w/o: Deoksiribonukleozidai, w: 1,0 mM natrio piruvatas, w: 2,2 g/l NaHCO3
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 20 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Veislė / porūšis
(C57BL/6 x C3H) F2-op/op
Donoro amžius
Embrionas