Tartalomra ugrás
OP9
Szövet
Csontvelő, stroma
Szinonimák
OP-9

Dokumentumok

OP9

Cell line · Termékszám 305174

The OP9 cell line, a stromal cell line derived from the calvariae of op/op mice, has a mutation that leads to a lack of macrophage colony-stimulating fact...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az OP9 sejtvonal, az op/op egerek calvariae-jából származó stromasejtvonal olyan mutációval rendelkezik, amely a makrofág kolóniát stimuláló faktor (M-CSF) hiányához vezet, amely egy kritikus citokin, amely részt vesz a különböző sejttípusok, köztük a makrofágok és az oszteoklasztok differenciálódásában, túlélésében és működésében.

Az OP9 sejteket széles körben használják a vérképzőszervi kutatások területén, mint feeder rétegeket a ko-kultúrás rendszerekben, hogy támogassák mind a vérképző őssejtek (HSC), mind az embrionális őssejtek (ESC) differenciálódását és terjeszkedését. Ezek a ko-kultúrás rendszerek megkönnyítették a vérképzőszervi differenciálódási útvonalak tanulmányozását, lehetővé téve az MSC-k számára, hogy felnőtt erythroid sejtekké, erythroblastokká és vörösvértestekké, valamint osteocitákká, chondrocitákká, myocitákká, tenocitákká és adipocitákká differenciálódjanak. Az OP9 sejtek támogató szerepe ezekben a rendszerekben annak tulajdonítható, hogy képesek az őssejtek proliferációjához és a vonal-specifikus differenciálódáshoz nélkülözhetetlen citokinekben és növekedési faktorokban gazdag, kedvező mikrokörnyezetet létrehozni.

Továbbá az OP9 sejtvonal fontos szerepet játszik a leukocita reakció és az immunsejtek, például a természetes ölősejtek (NK) fejlődésének tanulmányozásában, ami bizonyítja az OP9 egérvonal hasznosságát az immunológiai kutatásban. Az OP9 sejtek által termelt szekréciós faktorok, köztük olyan növekedési faktorok, mint a bFGF, IGF-1, IL-3, PDGF-BB, TGF-β1 és TGF-β3, kritikus szerepet játszanak a sejtek migrációs és differenciálódási folyamataiban.

Az OP9 sejtek fibroblaszt-szerű megjelenést mutatnak, amelyet orsó alakú, lapos morfológia jellemez. Ez a morfológiai tulajdonság jellemző a mesenchymális stróma sejtekre, amelyek a csontvelő mikrokörnyezetében betöltött támogató funkcióikról ismertek.

Hatalmas potenciáljuk ellenére az OP9 sejtek nem halhatatlan természetük miatt korlátokba ütköznek, ami rövid távú és kis léptékű projektekre korlátozza felhasználásukat, kiemelve a gondos tervezés és megfontolás szükségességét a kísérleti tervekben.

Szövet
Csontvelő, stroma
Szinonimák
  • OP-9

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Fibroblaszt-szerű

04Azonosítók

Hivatkozás
OP9 (Cytion katalógusszám: 305174)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_4398

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabil glutamin, w/o: Ribonukleozidok, w/o: Dezoxiribonukleozidok, w: 1,0 mM nátrium-piruvát, w: 2,2 g/l NaHCO3
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 20% FBS-szel egészítsük ki
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Faj / alfaj
(C57BL/6 x C3H) F2-op/op
Az adományozó életkora
Embrió