İçeriğe atla
OP9
Doku
Kemik iliği, stroma
Eş anlamlılar
OP-9

OP9

Cell line · Ürün numarası 305174

The OP9 cell line, a stromal cell line derived from the calvariae of op/op mice, has a mutation that leads to a lack of macrophage colony-stimulating fact...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Op/op farelerin kalvaryumlarından türetilen bir stromal hücre hattı olan OP9 hücre hattı, makrofajlar ve osteoklastlar dahil olmak üzere çeşitli hücre tiplerinin farklılaşması, hayatta kalması ve işlevinde rol oynayan kritik bir sitokin olan makrofaj koloni uyarıcı faktör (M-CSF) eksikliğine yol açan bir mutasyona sahiptir.

OP9 hücreleri, hematopoez araştırmaları alanında hem hematopoetik kök hücrelerin (HSC'ler) hem de embriyonik kök hücrelerin (ESC'ler) farklılaşmasını ve genişlemesini desteklemek için ko-kültür sistemlerinde besleyici katmanlar olarak yaygın bir şekilde kullanılmaktadır. Bu ortak kültür sistemleri, MSC'lerin yetişkin eritroid hücrelerine, eritroblastlara ve kırmızı kan hücrelerine ve osteositlere, kondrositlere, miyositlere, tenositlere ve adipositlere farklılaşmasını sağlayarak hematopoietik farklılaşma yollarının incelenmesini kolaylaştırmıştır. OP9 hücrelerinin bu sistemlerdeki destekleyici rolü, kök hücre proliferasyonu ve soylara özgü farklılaşma için gerekli sitokinler ve büyüme faktörleri bakımından zengin elverişli bir mikro çevre üretme kabiliyetlerine bağlanmaktadır.

Ayrıca OP9 hücre hattı, lökosit reaksiyonunun ve doğal öldürücü (NK) hücreler gibi bağışıklık hücrelerinin gelişiminin incelenmesinde etkili olup OP9 fare hattının immünolojik araştırmalardaki faydasını göstermektedir. OP9 hücreleri tarafından üretilen ve bFGF, IGF-1, IL-3, PDGF-BB, TGF-β1 ve TGF-β3 gibi büyüme faktörlerini içeren salgı faktörleri, hücre göçü ve farklılaşma süreçlerinde kritik bir rol oynamaktadır.

OP9 hücreleri, iğ şeklinde, düz bir morfoloji ile karakterize edilen fibroblast benzeri bir görünüm sergiler. Bu morfolojik özellik, kemik iliği mikroçevresindeki destekleyici işlevleriyle bilinen mezenkimal stromal hücreler için tipiktir.

Geniş potansiyellerine rağmen, OP9 hücreleri ölümsüzleştirilmemiş doğaları nedeniyle sınırlamalara sahiptir, bu da kullanımlarını kısa vadeli ve küçük ölçekli projelerle sınırlandırır ve deneysel tasarımlarda dikkatli planlama ve değerlendirme ihtiyacının altını çizer.

Doku
Kemik iliği, stroma
Eş anlamlılar
  • OP-9

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
OP9 (Cytion katalog numarası 305174)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_4398

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Alfa MEM, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w/o: Ribonükleozitler, w/o: Deoksiribonükleozitler, w: 1.0 mM Sodyum piruvat, w: 2.2g/L NaHCO3
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %20 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Tür / alt tür
(C57BL/6 x C3H) F2-op/op
Bağışçının yaşı
Embriyo