OP9
Cell line · Product number 305174
The OP9 cell line, a stromal cell line derived from the calvariae of op/op mice, has a mutation that leads to a lack of macrophage colony-stimulating fact...
Customization / Recommendations
- OP9Cell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
เซลล์ไลน์ OP9 ซึ่งเป็นเซลล์ไลน์สโตรมาที่ได้มาจากกะโหลกศีรษะของหนู op/op มีการกลายพันธุ์ที่นำไปสู่การขาดปัจจัยกระตุ้นโคโลนีของแมคโครฟาจ (M-CSF) ซึ่งเป็นไซโตไคน์ที่สำคัญในการแยกตัว การอยู่รอด และการทำงานของเซลล์หลายประเภท รวมถึงแมคโครฟาจและออสทีโอคลาสต์
เซลล์ OP9 ได้ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในด้านการวิจัยการสร้างเม็ดเลือดในฐานะชั้นฟีดเดอร์ในระบบเพาะเลี้ยงร่วมเพื่อสนับสนุนการแยกตัวและการขยายตัวของทั้งเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือด (HSCs) และเซลล์ต้นกำเนิดตัวอ่อน (ESCs)ระบบเพาะเลี้ยงร่วมเหล่านี้ได้เอื้ออำนวยการศึกษาเส้นทางความแตกต่างของเซลล์เม็ดเลือด ทำให้เซลล์ต้นกำเนิด multipotent (MSCs) สามารถเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์เม็ดเลือดแดงในผู้ใหญ่, erythroblasts, และเซลล์เม็ดเลือดแดง และ osteocytes, chondrocytes, myocytes, tenocytes, และ adipocytes บทบาทสนับสนุนของเซลล์ OP9 ในระบบเหล่านี้เกิดจากความสามารถในการสร้างสภาพแวดล้อมจุลภาคที่เอื้ออำนวยซึ่งอุดมไปด้วยไซโตไคน์และปัจจัยการเจริญเติบโตที่จำเป็นสำหรับการเพิ่มจำนวนของเซลล์ต้นกำเนิดและการเปลี่ยนแปลงเฉพาะสายพันธุ์
นอกจากนี้ สายเซลล์ OP9 ยังมีบทบาทสำคัญในการศึกษาปฏิกิริยาของเม็ดเลือดขาวและการพัฒนาของเซลล์ภูมิคุ้มกัน เช่น เซลล์เพชฌฆาตธรรมชาติ (NK) ซึ่งแสดงให้เห็นถึงประโยชน์ของสายพันธุ์หนู OP9 ในการวิจัยด้านภูมิคุ้มกันวิทยาปัจจัยการหลั่งที่ผลิตโดยเซลล์ OP9 รวมถึงปัจจัยการเจริญเติบโตเช่น bFGF, IGF-1, IL-3, PDGF-BB, TGF-β1, และ TGF-β3 มีบทบาทสำคัญในกระบวนการเคลื่อนย้ายและการเปลี่ยนแปลงของเซลล์
เซลล์ OP9 มีลักษณะคล้ายไฟโบรบลาสต์ โดยมีรูปร่างเป็นเส้นใยคล้ายแกนและแบน ลักษณะทางสัณฐานวิทยาดังกล่าวเป็นลักษณะเฉพาะของเซลล์สเต็มเซลล์จากเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน (mesenchymal stromal cells) ซึ่งเป็นที่รู้จักกันดีว่ามีหน้าที่สนับสนุนในสภาพแวดล้อมจุลภาคของไขกระดูก
แม้ว่าเซลล์ OP9 จะมีศักยภาพมหาศาล แต่ก็มีข้อจำกัดเนื่องจากธรรมชาติที่ไม่เป็นอมตะ ซึ่งจำกัดการใช้งานให้อยู่ในโครงการระยะสั้นและขนาดเล็กเท่านั้น สะท้อนให้เห็นถึงความจำเป็นในการวางแผนและพิจารณาอย่างรอบคอบในการออกแบบการทดลอง
- Tissue
- ไขกระดูก, สโตรมา
- Synonyms
- OP-9
02Classification
- Organism
- Mouse
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- คล้ายไฟโบรบลาสต์
04Identifiers
- Citation
- OP9 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305174)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4398
05Handling and culture
- Culture medium
- Alpha MEM, w: กลูตามีนเสถียร 2.0 มิลลิโมลาร์, w/o: ไรโบนิวคลีโอไซด์, w/o: เดโซออกซีไรโบนิวคลีโอไซด์, w: โซเดียมไพรูเวต 1.0 มิลลิโมลาร์, w: NaHCO3 2.2 กรัม/ลิตร
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 20%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
07Donor
- Breed / subspecies
- (C57BL/6 x C3H) F2-op/op
- Donor age
- เอ็มบริโอ
08Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)