Mine otse sisu juurde
OP9
Kude
Luuüdi, strooma
Sünonüümid
OP-9

Dokumendid

OP9

Cell line · Toote number 305174

The OP9 cell line, a stromal cell line derived from the calvariae of op/op mice, has a mutation that leads to a lack of macrophage colony-stimulating fact...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

OP9 rakuliinil, op/op-hiirte vasikate stroomisel rakuliinil, on mutatsioon, mis põhjustab makrofaagide kolooniaid stimuleeriva faktori (M-CSF) puudumist, mis on kriitiline tsütokiin, mis on seotud erinevate rakutüüpide, sealhulgas makrofaagide ja osteoklastide diferentseerumise, ellujäämise ja funktsiooniga.

OP9 rakke on laialdaselt kasutatud hematopoeesia uurimise valdkonnas söödakihina ko-kultuurisüsteemides, et toetada nii hematopoeetiliste tüvirakkude (HSC) kui ka embrüonaalsete tüvirakkude (ESC) diferentseerumist ja ekspansiooni. Need ko-kultuurisüsteemid on hõlbustanud vereloome diferentseerumisradade uurimist, võimaldades MSC-del diferentseeruda täiskasvanud erütrooidseteks rakkudeks, erütroblastideks ja punasteks vererakkudeks ning osteotsüütideks, kondrotsüütideks, müotsüütideks, tenotsüütideks ja adipotsüütideks. OP9 rakkude toetav roll nendes süsteemides on tingitud nende võimest toota soodsat mikrokeskkonda, mis on rikas tsütokiinide ja kasvufaktorite poolest, mis on olulised tüvirakkude proliferatsiooniks ja liinispetsiifiliseks diferentseerumiseks.

Lisaks sellele on OP9 rakuliin oluline leukotsüütide reaktsiooni ja selliste immuunrakkude nagu loomulikud tapjarakud (NK) arengu uurimisel, mis näitab OP9 hiireliini kasulikkust immunoloogilistes uuringutes. OP9 rakkude poolt toodetavad sekretoorsed faktorid, sealhulgas sellised kasvufaktorid nagu bFGF, IGF-1, IL-3, PDGF-BB, TGF-β1 ja TGF-β3, mängivad kriitilist rolli rakkude migratsiooni- ja diferentseerumisprotsessides.

OP9 rakkudel on fibroblastide sarnane välimus, mida iseloomustab spindlikujuline, lame morfoloogia. See morfoloogiline omadus on tüüpiline mesenhüümsetele stroomirakkudele, mis on tuntud oma toetavate funktsioonide poolest luuüdi mikrokeskkonnas.

Vaatamata nende suurele potentsiaalile on OP9 rakkudel piirangud, mis tulenevad nende mittemortaliseeritud olemusest, mis piirab nende kasutamist lühiajaliste ja väikesemahuliste projektidega, rõhutades vajadust hoolikalt planeerida ja kaaluda eksperimentaalseid kavasid.

Kude
Luuüdi, strooma
Sünonüümid
  • OP-9

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed

04Tunnused

Viide
OP9 (Cytioni katalooginumber 305174)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_4398

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w/o: Ribonukleosiidid, w/o: Deoksüribonukleosiidid, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,2g/L NaHCO3
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada keskkonda 20% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
(C57BL/6 x C3H) F2-op/op
Doonori vanus
Embrüo