OP9

OP9-solulinjalla, joka on op/op-hiirten calvariae-korvakkeista peräisin oleva stroomasolulinja, on mutaatio, joka johtaa makrofagikolonioita stimuloivan tekijän (M-CSF) puuttumiseen. M-CSF on kriittinen sytokiini, joka on mukana erilaisten solutyyppien, kuten makrofagien ja osteoklastien, erilaistumisessa, selviytymisessä ja toiminnassa.

OP9-soluja on käytetty laajalti hematopoieesitutkimuksessa syöttökerroksina yhteiskulttuurijärjestelmissä tukemaan sekä hematopoieettisten kantasolujen (HSC) että alkion kantasolujen (ESC) erilaistumista ja laajenemista. Nämä yhteiskulttuurijärjestelmät ovat helpottaneet hematopoieettisten erilaistumisreittien tutkimista, ja niiden avulla MSC:t voivat erilaistua aikuisten erytroidisoluiksi, erytroblasteiksi ja punasoluiksi sekä osteosyyteiksi, kondrosyyteiksi, myosyyteiksi, tenosyyteiksi ja adiposyyteiksi. OP9-solujen tukeva rooli näissä järjestelmissä johtuu niiden kyvystä tuottaa suotuisa mikroympäristö, jossa on runsaasti kantasolujen proliferaatiolle ja linjaspesifiselle erilaistumiselle välttämättömiä sytokiineja ja kasvutekijöitä.

Lisäksi OP9-solulinja on tärkeä leukosyyttien reaktion ja immuunisolujen, kuten luonnollisten tappajasolujen (NK-solujen), kehityksen tutkimisessa, mikä osoittaa OP9-hiirilinjan hyödyllisyyden immunologisessa tutkimuksessa. OP9-solujen tuottamat eritystekijät, mukaan lukien kasvutekijät, kuten bFGF, IGF-1, IL-3, PDGF-BB, TGF-β1 ja TGF-β3, ovat ratkaisevassa asemassa solujen siirtymis- ja erilaistumisprosesseissa.

OP9-soluilla on fibroblastien kaltainen ulkonäkö, jolle on ominaista karanmuotoinen, litteä morfologia. Tämä morfologinen piirre on tyypillinen mesenkimaalisille stroomaalisille soluille, jotka tunnetaan tukitoiminnoistaan luuytimen mikroympäristössä.

Huolimatta niiden laajasta potentiaalista OP9-soluilla on rajoituksia, jotka johtuvat niiden ei-immortalisoituneesta luonteesta, mikä rajoittaa niiden käytön lyhytaikaisiin ja pienimuotoisiin hankkeisiin, mikä korostaa huolellisen suunnittelun ja harkinnan tarvetta koesuunnitelmissa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa