OP9
Cell line · Product number 305174
The OP9 cell line, a stromal cell line derived from the calvariae of op/op mice, has a mutation that leads to a lack of macrophage colony-stimulating fact...
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01General information
- Description
OP9细胞系是一种从OP/OP小鼠腓肠肌中提取的基质细胞系,它的基因突变导致其缺乏巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF),而M-CSF是一种关键的细胞因子,参与包括巨噬细胞和破骨细胞在内的各种细胞类型的分化、存活和功能。
在造血研究领域,OP9 细胞被广泛用作共培养系统中的饲养层,以支持造血干细胞(HSCs)和胚胎干细胞(ESCs)的分化和扩增。这些共培养系统促进了造血分化途径的研究,使间叶干细胞能够分化为成人红细胞、红细胞、红血球以及骨细胞、软骨细胞、肌细胞、腱细胞和脂肪细胞。OP9细胞之所以能在这些系统中发挥支持作用,是因为它们能产生一个有利的微环境,其中富含干细胞增殖和特异性分化所必需的细胞因子和生长因子。
此外,OP9 细胞系还有助于研究白细胞反应和免疫细胞(如自然杀伤(NK)细胞)的发育,证明了 OP9 小鼠系在免疫学研究中的实用性。OP9 细胞产生的分泌因子,包括 bFGF、IGF-1、IL-3、PDGF-BB、TGF-β1 和 TGF-β3 等生长因子,在细胞迁移和分化过程中起着至关重要的作用。
OP9 细胞表现出类似成纤维细胞的外观,其特征是纺锤形的扁平形态。这种形态特征是间充质基质细胞的典型特征,而间充质基质细胞因其在骨髓微环境中的支持功能而闻名。
尽管 OP9 细胞具有巨大的潜力,但由于其非模式化的特性,其使用也有局限性,这就限制了其在短期和小规模项目中的使用,强调了在实验设计中仔细规划和考虑的必要性。
- Tissue
- 骨髓、基质
- Synonyms
- OP-9
02Classification
- Organism
- Mouse
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 纤维母细胞样
04Identifiers
- Citation
- OP9(Cytion 产品编号 305174)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4398
05Handling and culture
- Culture medium
- 阿尔法 MEM,含:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,不含:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,不含:2.0 mM 稳定谷氨酰胺:不含核糖核苷,不含脱氧核糖核苷:脱氧核苷,含 1.0 毫摩尔丙酮酸钠,含 2.2 克/升 NaHCO3
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 20% 的 FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
07Donor
- Breed / subspecies
- (C57BL/6 x C3H) F2-op/op
- Donor age
- 胚胎
08Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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