Gå direkte til indholdet
OP9
Væv
Knoglemarv, stroma
Synonymer
OP-9

Dokumenter

OP9

Cell line · Varenummer 305174

The OP9 cell line, a stromal cell line derived from the calvariae of op/op mice, has a mutation that leads to a lack of macrophage colony-stimulating fact...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

OP9-cellelinjen, en stromal cellelinje, der stammer fra calvariae fra op/op-mus, har en mutation, der fører til mangel på makrofagkolonistimulerende faktor (M-CSF), som er et kritisk cytokin, der er involveret i differentiering, overlevelse og funktion af forskellige celletyper, herunder makrofager og osteoklaster.

OP9-celler er blevet brugt i vid udstrækning inden for forskning i hæmatopoiese som feederlag i co-kultursystemer for at understøtte differentiering og ekspansion af både hæmatopoietiske stamceller (HSC'er) og embryonale stamceller (ESC'er). Disse samdyrkningssystemer har lettet studiet af hæmatopoietiske differentieringsveje og gjort det muligt for MSC'er at differentiere til voksne erythroidceller, erythroblaster og røde blodlegemer samt osteocytter, chondrocytter, myocytter, tenocytter og adipocytter. OP9-cellernes understøttende rolle i disse systemer tilskrives deres evne til at producere et gunstigt mikromiljø, der er rigt på cytokiner og vækstfaktorer, som er afgørende for stamcelleproliferation og linjespecifik differentiering.

Desuden er OP9-cellelinjen medvirkende til at studere leukocytreaktionen og udviklingen af immunceller såsom naturlige dræberceller (NK-celler), hvilket viser OP9-muselinjens anvendelighed i immunologisk forskning. De sekretoriske faktorer, der produceres af OP9-celler, herunder vækstfaktorer som bFGF, IGF-1, IL-3, PDGF-BB, TGF-β1 og TGF-β3, spiller en afgørende rolle i cellemigrations- og differentieringsprocesser.

OP9-celler udviser et fibroblastlignende udseende, der er karakteriseret ved en spindelformet, flad morfologi. Dette morfologiske træk er typisk for mesenkymale stromaceller, som er kendt for deres støttende funktioner i knoglemarvsmikromiljøet.

På trods af deres store potentiale har OP9-celler begrænsninger på grund af deres ikke-udødelige natur, som begrænser deres anvendelse til kortvarige og små projekter, hvilket understreger behovet for omhyggelig planlægning og overvejelse i forsøgsdesign.

Væv
Knoglemarv, stroma
Synonymer
  • OP-9

02Klassificering

Organisme
Mus
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Fibroblast-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
OP9 (Cytion-katalognummer 305174)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_4398

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
Alpha MEM, m: 2,0 mM stabil glutamin, uden: Ribonukleosider, w/o: Deoxyribonukleosider, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2g/L NaHCO3
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 20% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Race / underart
(C57BL/6 x C3H) F2-op/op
Donorens alder
Embryo