Preskoči na vsebino
OP9
Tkivo
Kostni mozeg, stroma
Sinonimi
OP-9

Dokumenti

OP9

Cell line · Številka izdelka 305174

The OP9 cell line, a stromal cell line derived from the calvariae of op/op mice, has a mutation that leads to a lack of macrophage colony-stimulating fact...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija OP9, stromalna celična linija, pridobljena iz kalvarije miši op/op, ima mutacijo, ki povzroča pomanjkanje makrofage kolonije stimulirajočega faktorja (M-CSF), ki je ključni citokin, vključen v diferenciacijo, preživetje in delovanje različnih vrst celic, vključno z makrofagi in osteoklasti.

Celice OP9 se pogosto uporabljajo na področju raziskav hematopoeze kot napajalne plasti v sistemih ko-kulture za podporo diferenciacije in širjenja hematopoetskih matičnih celic (HSC) in embrionalnih matičnih celic (ESC). Ti sistemi za so-kultiviranje so olajšali preučevanje hematopoetskih diferenciacijskih poti, saj MSC omogočajo diferenciacijo v odrasle eritroidne celice, eritroblaste in eritrocite ter osteocite, hondrocite, miocite, tenocite in adipocite. Podporno vlogo celic OP9 v teh sistemih pripisujejo njihovi sposobnosti ustvarjanja ugodnega mikrookolja, bogatega s citokini in rastnimi dejavniki, ki so bistveni za proliferacijo matičnih celic in diferenciacijo po posameznih linijah.

Poleg tega je celična linija OP9 pomembna za preučevanje reakcije levkocitov in razvoja imunskih celic, kot so naravne celice ubijalke (NK), kar dokazuje uporabnost mišje linije OP9 v imunoloških raziskavah. Dejavniki izločanja, ki jih proizvajajo celice OP9, vključno z rastnimi dejavniki, kot so bFGF, IGF-1, IL-3, PDGF-BB, TGF-β1 in TGF-β3, imajo ključno vlogo pri procesih migracije in diferenciacije celic.

Celice OP9 so podobne fibroblastom, za katere je značilna vretenasta in ploščata morfologija. Ta morfološka lastnost je značilna za mezenhimske stromalne celice, ki so znane po svojih podpornih funkcijah v mikrookolju kostnega mozga.

Kljub velikemu potencialu imajo celice OP9 omejitve zaradi svoje neimortalizirane narave, kar omejuje njihovo uporabo na kratkoročne in majhne projekte, kar poudarja potrebo po skrbnem načrtovanju in premisleku pri načrtovanju poskusov.

Tkivo
Kostni mozeg, stroma
Sinonimi
  • OP-9

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblastom podobni

04Identifikatorji

Navajanje vira
OP9 (kataloška številka Cytion 305174)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4398

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w/o: Ribonukleozidi, w/o: NaHCO3, w: 1,0 mM natrijev piruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM deoksiribonukleozidi
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 20 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Pasma / podvrsta
(C57BL/6 x C3H) F2-op/op
Starost darovalca
Zarodek