Skip to content
OP9
Tissue
מח עצם, סטרומה
Synonyms
OP-9

Documents

OP9

Cell line · Product number 305174

The OP9 cell line, a stromal cell line derived from the calvariae of op/op mice, has a mutation that leads to a lack of macrophage colony-stimulating fact...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים OP9, קו תאים סטרומליים שמקורם בגולגולת של עכברי op/op, כולל מוטציה הגורמת לחוסר בגורם מגרה מושבות מקרופאגים (M-CSF), ציטוקין חיוני המעורב בהבחנה, הישרדות ותפקוד של סוגי תאים שונים, כולל מקרופאגים ואוסטאוקלסטים.

תאי OP9 שימשו רבות בתחום מחקר ההמטופויזיס כרובד מזין במערכות תרבית משותפת כדי לתמוך בהבחנה ובהתרחבות של תאי גזע המטופויטיים (HSCs) ותאי גזע עובריים (ESCs). מערכות תרבית משותפת אלה הקלו על חקר מסלולי ההבחנה ההמטופויטית, ואפשרו לתאי גזע מזנכימליים (MSCs) להבחין לתאי דם אדומים בוגרים, אריתרובלסטים ותאי דם אדומים, וכן לתאי עצם, תאי סחוס, תאי שריר, תאי גידים ותאי שומן. תפקידם התומך של תאי OP9 במערכות אלה מיוחס ליכולתם לייצר מיקרו-סביבה תומכת העשירה בציטוקינים ובגורמי גדילה החיוניים להתרבות תאי גזע ולהבחנה ספציפית לשושלת.

יתר על כן, קו התאים OP9 מסייע בחקר תגובת הלוקוציטים והתפתחות תאי חיסון כגון תאי NK (Natural Killer), מה שמדגים את התועלת של קו העכברים OP9 במחקר אימונולוגי. הגורמים הסודיים המיוצרים על ידי תאי OP9, כולל גורמי גדילה כגון bFGF, IGF-1, IL-3, PDGF-BB, TGF-β1 ו-TGF-β3, ממלאים תפקיד קריטי בתהליכי נדידת תאים והבחנה.

תאי OP9 מציגים מראה דמוי פיברובלסט, המאופיין במורפולוגיה שטוחה בצורת ציר. תכונה מורפולוגית זו אופיינית לתאי סטרומה מזנכימליים, הידועים בתפקידי התמיכה שלהם בסביבה המיקרוסקופית של מח העצם.

למרות הפוטנציאל העצום שלהם, לתאי OP9 יש מגבלות בשל אופיין הלא-אלמותי, המגביל את השימוש בהם לפרויקטים קצרי טווח וקטני היקף, מה שמדגיש את הצורך בתכנון ובשיקול דעת קפדניים בעיצוב הניסויים.

Tissue
מח עצם, סטרומה
Synonyms
  • OP-9

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי פיברובלסט

04Identifiers

Citation
OP9 (מספר קטלוג של Cytion: 305174)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_4398

05Handling and culture

Culture medium
אלפא MEM, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w/o: ריבונוקליאוסידים, w/o: דוקסיריבונוקליאוסידים, w: 1.0 mM נתרן פירובט, w: 2.2g/L NaHCO3
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 20% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Breed / subspecies
(C57BL/6 x C3H) F2-op/op
Donor age
עובר