Gå direkt till innehållet
OP9
Vävnad
Benmärg, stroma
Synonymer
OP-9

OP9

Cell line · Produktnummer 305174

The OP9 cell line, a stromal cell line derived from the calvariae of op/op mice, has a mutation that leads to a lack of macrophage colony-stimulating fact...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

OP9-cellinjen, en stromal cellinje som härrör från calvariae hos op/op-möss, har en mutation som leder till brist på makrofagkolonistimulerande faktor (M-CSF), som är en kritisk cytokin som är involverad i differentiering, överlevnad och funktion hos olika celltyper, inklusive makrofager och osteoklaster.

OP9-celler har använts i stor utsträckning inom hematopoiesforskning som matarskikt i samodlingssystem för att stödja differentiering och expansion av både hematopoetiska stamceller (HSC) och embryonala stamceller (ESC). Dessa samodlingssystem har underlättat studierna av hematopoetiska differentieringsvägar och gjort det möjligt för MSC att differentiera till vuxna erytroida celler, erytroblaster och röda blodkroppar samt osteocyter, kondrocyter, myocyter, tenocyter och adipocyter. OP9-cellernas stödjande roll i dessa system tillskrivs deras förmåga att skapa en gynnsam mikromiljö som är rik på cytokiner och tillväxtfaktorer som är nödvändiga för stamcellernas proliferation och linjespecifika differentiering.

OP9-cellinjen är dessutom viktig för att studera leukocytreaktionen och utvecklingen av immunceller som naturliga mördarceller (NK-celler), vilket visar att OP9-muslinjen är användbar inom immunologisk forskning. De sekretoriska faktorer som produceras av OP9-celler, inklusive tillväxtfaktorer som bFGF, IGF-1, IL-3, PDGF-BB, TGF-β1 och TGF-β3, spelar en avgörande roll i cellmigrations- och differentieringsprocesser.

OP9-cellerna uppvisar ett fibroblastliknande utseende, som kännetecknas av en spindelformad, platt morfologi. Detta morfologiska drag är typiskt för mesenkymala stromaceller, som är kända för sina stödjande funktioner i benmärgens mikromiljö.

Trots sin enorma potential har OP9-celler begränsningar på grund av att de inte är odödliga, vilket begränsar användningen till kortsiktiga och småskaliga projekt och understryker behovet av noggrann planering och överväganden vid experimentell design.

Vävnad
Benmärg, stroma
Synonymer
  • OP-9

02Klassificering

Organism
Mus
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblastliknande

04Identifierare

Källa
OP9 (Cytion katalognummer 305174)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_4398

05Hantering och odling

Odlingsmedium
Alpha MEM, med: 2,0 mM stabilt glutamin, utan Ribonukleosider, w/o: Deoxyribonukleosider, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 20% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Ras / underart
(C57BL/6 x C3H) F2-op/op
Donatorns ålder
Embryo