OP9

A linha de células OP9, uma linha de células estromais derivada das calvárias de ratinhos op/op, tem uma mutação que leva à falta de fator estimulador de colónias de macrófagos (M-CSF), que é uma citocina crítica envolvida na diferenciação, sobrevivência e função de vários tipos de células, incluindo macrófagos e osteoclastos.

As células OP9 têm sido amplamente utilizadas no domínio da investigação da hematopoiese como camadas de alimentação em sistemas de co-cultura para apoiar a diferenciação e a expansão de células estaminais hematopoiéticas (HSC) e de células estaminais embrionárias (ESC). Estes sistemas de co-cultura facilitaram o estudo das vias de diferenciação hematopoiética, permitindo às MSCs diferenciarem-se em células eritróides adultas, eritroblastos e glóbulos vermelhos e osteócitos, condrócitos, miócitos, tenócitos e adipócitos. O papel de apoio das células OP9 nestes sistemas é atribuído à sua capacidade de produzir um microambiente propício, rico em citocinas e factores de crescimento essenciais para a proliferação de células estaminais e a diferenciação específica de linhagens.

Além disso, a linha de células OP9 é fundamental para o estudo da reação dos leucócitos e do desenvolvimento de células imunitárias, como as células assassinas naturais (NK), o que demonstra a utilidade da linha de ratinhos OP9 na investigação imunológica. Os factores secretores produzidos pelas células OP9, incluindo factores de crescimento como o bFGF, IGF-1, IL-3, PDGF-BB, TGF-β1 e TGF-β3, desempenham um papel fundamental nos processos de migração e diferenciação celular.

As células OP9 apresentam uma aparência semelhante à dos fibroblastos, caracterizada por uma morfologia fusiforme e plana. Esta caraterística morfológica é típica das células estromais mesenquimais, que são conhecidas pelas suas funções de suporte no microambiente da medula óssea.

Apesar do seu vasto potencial, as células OP9 têm limitações devido à sua natureza não imortalizada, o que limita a sua utilização a projectos de curto prazo e de pequena escala, sublinhando a necessidade de um planeamento cuidadoso e de uma ponderação nos desenhos experimentais.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia