PA317

PA317 est une lignée cellulaire de fibroblastes murins qui a été modifiée génétiquement pour exprimer de manière stable un système d’encapsidation rétrovirale amphotrope. Cette lignée cellulaire est largement utilisée dans la thérapie génique et la recherche en biologie moléculaire comme source de rétrovirus recombinants capables de transduire un large éventail de cellules de mammifères. La lignée PA317 est dérivée de fibroblastes NIH/3T3 et conserve une morphologie fibroblastique tout en présentant la capacité de produire des rétrovirus à titre élevé.

Les cellules PA317 sont conçues pour fournir des composants rétroviraux essentiels par trans, notamment les gènes gag, pol et env, tout en étant dépourvues de séquences virales capables de se répliquer. Cela garantit la sécurité dans les contextes expérimentaux et thérapeutiques en empêchant la formation de rétrovirus capables de se répliquer. La protéine d’enveloppe amphotrope exprimée par les cellules PA317 permet aux rétrovirus produits d’infecter un large éventail de types cellulaires chez différentes espèces, ce qui rend cette lignée cellulaire particulièrement précieuse pour les applications nécessitant un transfert génique efficace.

Cette lignée cellulaire est couramment utilisée pour produire des vecteurs rétroviraux destinés à l’administration de gènes dans le cadre d’études précliniques, notamment en recherche sur le cancer, en génie génétique et en médecine régénérative. Elle constitue également un choix privilégié pour la validation de constructions de vecteurs rétroviraux et l’optimisation des protocoles de production virale. La lignée PA317 offre une plateforme fiable pour le transfert génique médié par les rétrovirus, favorisant ainsi les avancées en thérapie génique et en recherche en génomique fonctionnelle.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.