PA317

PA317 es una línea celular de fibroblastos murinos que ha sido modificada genéticamente para expresar de manera estable un sistema de empaquetamiento retroviral anfotrópico. Esta línea celular se utiliza ampliamente en la investigación en terapia génica y biología molecular como productora de retrovirus recombinantes capaces de transducir una amplia gama de células de mamíferos. La PA317 se deriva de fibroblastos NIH/3T3 y conserva la morfología de los fibroblastos, al tiempo que muestra la capacidad de producir retrovirus de alto título.

Las células PA317 están diseñadas para proporcionar componentes retrovirales esenciales de forma trans, incluyendo los genes gag, pol y env, sin contener secuencias virales capaces de replicarse. Esto garantiza la seguridad en contextos experimentales y terapéuticos al impedir la formación de retrovirus capaces de replicarse. La proteína de envoltura amfotrópica expresada por las células PA317 permite que los retrovirus producidos infecten una amplia variedad de tipos celulares en diferentes especies, lo que hace que esta línea celular sea particularmente valiosa para aplicaciones que requieren una transferencia génica eficiente.

Esta línea celular se emplea comúnmente para producir vectores retrovirales destinados a la entrega de genes en estudios preclínicos, incluyendo la investigación del cáncer, la ingeniería genética y la medicina regenerativa. También es la opción preferida para validar construcciones de vectores retrovirales y optimizar los protocolos de producción viral. La PA317 ofrece una plataforma confiable para la transferencia génica mediada por retrovirus, lo que contribuye a los avances en la terapia génica y la investigación en genómica funcional.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.