PA317
Cell line · Ürün numarası 305617
Kişiselleştirme / Öneriler
- PA317Cell line€550.00
Önerilen (en taze parti)
01Genel bilgiler
- Açıklama
PA317, amfotropik bir retroviral paketleme sistemini kararlı bir şekilde eksprese edecek şekilde tasarlanmış bir fare fibroblast hücre hattıdır. Bu hücre hattı, çok çeşitli memeli hücrelerine gen aktarımı yapabilen rekombinant retrovirüslerin üreticisi olarak gen terapisi ve moleküler biyoloji araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. PA317, NIH/3T3 fibroblastlarından türetilmiştir ve yüksek titreli retrovirüsler üretme yeteneği sergilerken fibroblast morfolojisini korur.
PA317 hücreleri, replikasyon yeteneğine sahip virüs dizileri içermezken, gag, pol ve env genleri dahil olmak üzere gerekli retroviral bileşenleri trans olarak sağlayacak şekilde tasarlanmıştır. Bu, replikasyon yeteneğine sahip retrovirüslerin oluşumunu önleyerek deneysel ve terapötik bağlamlarda güvenliği sağlar. PA317 hücreleri tarafından eksprese edilen amfotropik zar proteini, üretilen retrovirüslerin farklı türlerdeki çok çeşitli hücre tiplerini enfekte etmesini sağlar; bu da bu hücre hattını, verimli gen transferi gerektiren uygulamalar için özellikle değerli kılar.
Bu hücre hattı, kanser araştırmaları, genetik mühendisliği ve rejeneratif tıp dahil olmak üzere preklinik çalışmalarda gen aktarımı için retroviral vektörler üretmek amacıyla yaygın olarak kullanılmaktadır. Ayrıca, retroviral vektör yapılarının doğrulanması ve viral üretim protokollerinin optimize edilmesi için de tercih edilen bir seçenektir. PA317, retrovirüs aracılı gen transferi için güvenilir bir platform sunarak, gen terapisi ve fonksiyonel genomik araştırmalarındaki ilerlemeleri destekler.
- Doku
- Embriyo
- Uygulamalar
- 3D hücre kültürü
- Eş anlamlılar
- pA317
02Sınıflandırma
- Canlı
- Fare
- Cinsiyet
- Erkek
- Büyüme özellikleri
- Bağlı
- GDO durumu
- GMO-S1
- GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
- GMO-S1: This PA317 retroviral packaging line contains MoMLV gag/pol/env components enabling production of replication-defective retroviral particles. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biyogüvenlik seviyesi
- 2
03Özellikler
- Morfoloji
- Fibroblast benzeri
- Hücre türü
- Fibroblast
04Tanımlayıcılar
- Kaynak gösterimi
- PA317 (Cytion katalog numarası 305617)
- NCBI Vergi Kimlik Numarası
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_3920
05İfade ve duyarlılık
- Virüsler
- Moloney Fare Lösemi Virüsü (MoMLV)
06İşleme ve yetiştirme
- Besiyeri
- DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
- Kuluçka ortamı
37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.
- Takviyeler
- Ortamı %10 FBS ile takviye edin
- Ayrıştırma reaktifi
- Accutase
- Alt kültür oluşturma
- Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri TrypLE Express ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
- Çözme ve kültürleme
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon
- Kısırlık
Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.
Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.
- Dondurma ortamı
- Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
- Saklama koşulları
Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.
- Nakliye koşulları
Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
08Bağışçı
- Tür / alt tür
- NIH İsviçre
09Yasal ve güvenlik
- Güvenlik önlemleri
- İleride çözdürmek üzere sıvı nitrojen içinde bir kriyoviyal saklamayı planlarken, sıkı güvenlik önlemlerine uymak zorunludur. Uygun koruyucu eldivenler ve giysiler şarttır ve dondurulmuş numunelerin sıvı nitrojen tankına veya tanktan transferi sırasında yüz maskesi veya koruyucu gözlük kullanılması gerekir. Bu, çıkarma sırasında keskin parçaların fırlamasına neden olabilecek potansiyel kriyoviyal patlamalardan kaynaklanan yaralanma riskini azaltmak içindir.
- Garanti
Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz
Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın
- Malzeme Transfer Anlaşması gereklidir
- Evet
10Ürün detayları
- Bileşim tablosu
